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0在进行病理分析时,切片染色无疑是至关重要的一环。尽管大家都曾尝试过,但成果却千差万别。为何别人做出来的切片染色那么好看,而自己总是做不好? 今天小编给大家分享一些切片染色的独门绝技。 石蜡切片技巧 1. 样本取材 • 迅速行动,避免组织细胞成分与结构的改变。 • 轻柔操作,最大限度减少样本损伤。 2. 样本固定 • 固定液需即配即用,以防氧化还原反应导致失效。配置后置于阴凉避光处保存。 • 确保固定液充足(通常为样本体积
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0一、实验基础原理 1、BCA法概述 BCA法,全称为二喹啉甲酸检测法,是一种被广泛应用于蛋白质浓度测定的方法。它的基本原理在于,铜离子(Cu2+)在碱性条件下会与蛋白质中的多肽链发生反应。 具体而言,铜离子会与含有硫的氨基酸(例如半胱氨酸)以及含有氮的氨基酸(如赖氨酸)进行一系列复杂的化学反应。这一过程中,铜离子被还原为Cu+,这是整个实验的关键转化环节。 随后,还原态的铜离子(Cu+)会与BCA试剂发生反应,生成一种呈现紫色的
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6医学核心行业痛点:1.价格贵2.周期慢3.成功率低 鱼和熊掌不可兼得,我认为的最优方案应该是:成功率保障的是前提条件下,客户需明确价格与周期的优先级。 价格优先级高,就选直投正常稿,价格低。(这个是我这边的模式) 周期优先级高,就选关系加急稿,周期快。
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0一、ELISA基本原理 ELISA的核心原理在于,将抗原或抗体固定于固相载体表面,待测样本中的相应抗体或抗原会与之发生特异性结合。洗涤后,加入酶标记的抗原或抗体,形成免疫复合物。在底物存在下,酶催化底物产生颜色反应,从而进行检测。ELISA以其高灵敏度和特异性,能够检测到极低浓度(皮摩尔级别)的目标物。 二、ELISA实验方法 ELISA根据设计不同,可分为直接法、间接法、夹心法和竞争法四种。 1. 直接ELISA:将抗原直接固定于固相载体上,
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0关于生化检验 一、生化检验概述 生化检验是基于探究生物体健康与疾病状态下的生物化学过程变迁,运用物理学、化学、生物学、病理学、免疫学及生物化学的理论与技术,通过测定生物体血液、尿液、脑脊液等样本中化学物质的量与质的变迁,为科研者提供疾病确诊、病情监控、疗效观测、预后评估及健康评判等信息,最终判定受检者是否存在潜在疾患或排除某些疾患、揭示疾病变迁及药物治疗对机体生物化学过程影响的一种技术途径。 二、生化
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0细胞培育是一项细致且高度技术性的任务,涵盖了细胞的增殖、繁衍、传代及冷冻保存等多个步骤。每一步骤均需谨慎操作,以保障细胞的健康状态和实验的精确度。今日,小曼将为大家阐述细胞从复苏至传代再到冷冻保存的流程里,一些或许被忽视却至关重要的细节。 1、如何挑选细胞培养基? 若所购细胞来源于ATCC或其他细胞库,可直接咨询供应商或查阅相关文献资料;培养基的种类繁多,其中最为常用的有四种——MEM、DMEM、1640、F-12。具体可参
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01️⃣THP-1细胞是从人单核细胞白血病细胞系,悬浮生长,可诱导为巨噬细胞 2️⃣培养基配制 1640➕10%血清or血清替代➕0.05mM β-巯基乙醇,双抗可加可不加 ⚠️THP-1对血清的要求比较高,刚开始用国产的血清一直养不起来,正好之前购买了一批【XR】的血清替代,就配了一管培养基试试,重新复苏一管后长得嘎嘎好,圆滚滚的,相对于进口血清,XR血清替代性价比很高~ ❗关于加不加β-巯基乙醇,我的经验来看是要加,没加细胞状态不好,THP-1细胞对氧
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0PCR(Polymerase Chain Reaction,聚合酶链式反应)是一种分子生物学技术,用于在生物体外快速、大量地复制特定的DNA片段。尽管PCR实验的原理和操作流程看似简单,但实际操作中却存在许多潜在的问题。以下是一些常见的PCR实验问题及相应的解决方案。 01拖尾、弥散现象 • 可能原因:体系配置偏差(如酶用量、dNTP、镁离子浓度过高)、扩增循环数过多、PCR体系中存在污染、电泳缓冲液不净、电压不稳定、退火时间不当、模板不纯等。 • 解决方案:减少
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0在科研实验中,伙伴们时常需评估细胞增殖的状态,譬如探究某个基因对细胞生长的调控作用,或是验证抗癌药物的有效性。小伙伴们,别再向师兄师姐求救了,这里为你汇总了细胞增殖检测的全方位攻略! 一、Brdu/EdU 标记技术 5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brdu),作为胸腺嘧啶的“替身演员”,在DNA合成的“戏剧”中替代主角出场。为了吸引目光,它还披上了特异性抗体的“华丽外衣”,在免疫荧光或流式细胞术的“闪光灯”下显露真身,揭示其参与DNA合
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0一、实验基础原理 1、BCA法概述 BCA法,全称为二喹啉甲酸检测法,是一种被广泛应用于蛋白质浓度测定的方法。它的基本原理在于,铜离子(Cu2+)在碱性条件下会与蛋白质中的多肽链发生反应。 具体而言,铜离子会与含有硫的氨基酸(例如半胱氨酸)以及含有氮的氨基酸(如赖氨酸)进行一系列复杂的化学反应。这一过程中,铜离子被还原为Cu+,这是整个实验的关键转化环节。 随后,还原态的铜离子(Cu+)会与BCA试剂发生反应,生成一种呈现紫色的
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0细胞培养中,一项基础而关键的技术便是细胞传代。这一过程旨在扩增细胞数量,同时预防细胞因过度密集而老化、衰退乃至死亡。以下,我们将以“贴壁细胞”为例,详细阐述传代的操作流程。 预备工作 相较于细胞复苏与冻存,细胞传代的预备步骤更为繁琐。为确保实验的顺利进行,实验前需详细列出所需器材与试剂,并逐一准备。实验器材,如无菌服、移液枪头、废液缸等,需经过高温高压灭菌处理。 同时,根据实验需求,预先计量并整理好细
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0基因,作为生物体遗传信息的核心载体,通过基因检测,我们能够洞察身体潜在的疾病风险,并及早采取预防措施或进行干预。基因,这一遗传的基本单位,是生成一条多肽链或功能性RNA所不可或缺的DNA片段,可简单理解为DNA长链中的特殊段落。 而基因研究的首要步骤便是核酸的获取。核酸提取,往往是生物学研究的起点,其质量的高低直接关乎下游实验的成败。无论是克隆、PCR、QPCR,还是建库测序等,都离不开核酸的支撑。今日,我们就来一同探
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0免疫荧光(Immunofluorescence,IF)技术是一种强大的生物学工具,它利用荧光标记的抗体来精确定位和定性分析组织或细胞内的特定抗原。在细胞生物学研究中,细胞免疫荧光染色尤为常见,它能够帮助科学家们深入了解细胞内部的结构和功能。接下来,我们将详细介绍细胞爬片免疫荧光实验的操作步骤及一些小技巧。 实验器材及试剂 • 仪器和耗材:洁净工作台、CO2恒温培养箱、涡旋混合器、移液枪、正置荧光显微镜、成像系统。 • 试剂:4%多聚甲醛
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0Western Blot(WB)技术是一种广泛应用的蛋白质研究手段,在生物医学领域中占据重要地位。然而,在实验执行过程中,研究者常会面临背景过高的挑战,这不仅削弱了实验结果的精确度,还可能引发对数据的错误理解。 背景过高的成因复杂多样,例如封闭不完全、抗体浓度超标、膜材料选择不当等均可能是诱因。接下来,我们将围绕这些问题展开探讨,并提出相应的应对策略,助力研究人员获取更为清晰、准确的实验结果。 一、完善封闭流程 1. 封闭
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0免疫荧光(Immunofluorescence,IF)技术是一种强大的生物学工具,它利用荧光标记的抗体来精确定位和定性分析组织或细胞内的特定抗原。在细胞生物学研究中,细胞免疫荧光染色尤为常见,它能够帮助科学家们深入了解细胞内部的结构和功能。接下来,我们将详细介绍细胞爬片免疫荧光实验的操作步骤及一些小技巧。 实验器材及试剂 • 仪器和耗材:洁净工作台、CO2恒温培养箱、涡旋混合器、移液枪、正置荧光显微镜、成像系统。 • 试剂:4%多聚甲醛
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000在自然界中,真菌以其独特的生物特性和广泛的应用领域,成为了生物多样性中不可或缺的一环。从餐桌上的美味蘑菇到致命的毒菌,从医药领域的青霉素到食品发酵的必备良剂,真菌在人类社会中发挥着多重作用。然而,随着生态环境的改变和人类活动的加剧,许多真菌种类正面临生存危机。因此,真菌的保藏工作显得尤为关键,它不仅是生物多样性保护的重要组成,也是科学研究和产业发展的基石。 真菌保藏,作为一项至关重要的生物技术,旨0一、淋巴结组织处理要点 1、淋巴结组织特性为结构紧密、细胞繁多,取样时需确保组织片厚度均匀,推荐0.2-0.3cm为最佳; 2、因淋巴结外包一层坚韧的结缔组织膜,阻碍液体渗透,故固定时间需延长至6-12小时,甚至可整夜固定,次日与常规组织同步脱水。若采用中性甲醛固定及乙醇脱水,两者时间均需加倍,同时可适当缩减二甲苯透明步骤的时间; 3、切片时,目标厚度为2-3μm,此厚度下组织易碎,展片时易出现皱褶、裂隙及不平整。因此,蜡块不0经过长时间的摸索与实践,Western Blot实验的过程虽曲折,但实则掌握其要领后并不复杂。我归纳了在进行WB实验时可能遭遇的难题,并剖析了潜在的诱因及相应的应对策略,期望能为你的实验成功奠定坚实基础。 常见问题及其应对策略:问题一 转膜效果欠佳 1. 膜浸润不均 • 采用纯甲醇充分浸润膜材料。 2. 目标蛋白分子量偏小(<10kDa) • 选用小孔径膜,并缩减转膜时长。 3. 目标蛋白等电点与转移缓冲液pH值相近或一致 • 尝试替换为其他缓冲体系0抗体,作为免疫学实验中不可或缺且成本高昂的工具,即便是国产品牌,每100微升的一抗也价格不菲,往往超过千元大关。考虑到其昂贵的价格与严格的运输存储要求,确实令人感到不小的挑战。接下来,让我们一同梳理抗体运输与储存的几个关键点,希望为科研同仁提供实用指南。 01运输条件优化 抗体在运输途中通常耗时约2-3天,此过程必须在严格控制的低温环境下进行。低温运输主要依赖冰袋或干冰,但鉴于多数抗体推荐在4℃或-20℃条件下保存0一、淋巴结组织处理要点 1、淋巴结组织特性为结构紧密、细胞繁多,取样时需确保组织片厚度均匀,推荐0.2-0.3cm为最佳; 2、因淋巴结外包一层坚韧的结缔组织膜,阻碍液体渗透,故固定时间需延长至6-12小时,甚至可整夜固定,次日与常规组织同步脱水。若采用中性甲醛固定及乙醇脱水,两者时间均需加倍,同时可适当缩减二甲苯透明步骤的时间; 3、切片时,目标厚度为2-3μm,此厚度下组织易碎,展片时易出现皱褶、裂隙及不平整。因此,蜡块不000000000免疫组化(IHC)技术:基于抗原与抗体的特异性结合机制,通过抗体标记组织细胞内的蛋白质,并利用化学反应显色,以精确识别这些蛋白质在组织细胞中的位置及其表达水平。 免疫组化结果解析 1. 对照设置:正确解读染色结果需依赖阳性对照(验证表达的组织,用以排除假阴性)与阴性对照(验证不表达的组织,用以排除假阳性)。 2. 阳性判定:仅当抗原特异性地表达于细胞或组织的预定部位时,方可判定为阳性;非特异性部位的表达不得视为阳000医学SCI核心期刊写发代发,个人代理公司都可先录用后付款00医学全科可收SCI 核心期刊先录用后付款代理也可0No.1 紫外线消毒的原理是什么? 紫外线根据生物效应不同,可以分为ABC等波段,我们常用的消毒功能主要采用UV-C波段,也就是200-275nm波段紫外线,其中最强的是250-270nm波段。 紫外线通过对微生物,例如细菌、病毒等病原体进行辐射损伤,破坏核酸功能,改变DNA或RNA生物活性,使得微生物失去繁殖能力,从而实现消毒杀菌功能,包括细菌繁殖体、芽孢、分枝杆菌、病毒、真菌、立克次体和支原体等都可以采用紫外线杀灭。 实验室紫外灯种类 热阴极低0