【转帖】血细胞分析仪50年的发展历史和展望
血细胞分析仪50年的发展历史和展望
中国医学科学院中国协和医科大学北京协和医院检验科张时民
1590 年荷兰人米德尔堡和詹森设计制造了最原始的显微镜（图1），1610 年伽利略使用望远镜观察小的物体并将其放大，后来被列文霍克改进成为原始的显微镜。1658 年意大利人马尔皮基应用最原始的显微镜首先观察到了红细胞，他是第一个见到红细胞的人，开始进行红细胞计数则是200 年后的事情了。而设计并生产出第一台血细胞计数仪则又过了近100 年。
自从发明了显微镜以后，人们从微观世界中了解和观察到了血液的组成，并根据他们的特点分别将它们称为红细胞和白细胞和血小板。在以后的研究中，人们发现许多疾病的发生和发展与血液中的细胞数量之间存在一定的关系。依据对疾病诊断的需求，人们开始寻求对血液中细胞的数量进行计数。1852 年就有人开始设计对红细胞的计数办法，1855 年发明了用于计数血细胞的计数板， 目前仍然使用的改良Neubauer 计数板就是应用最为广泛和持续时间最为长久的经典一种，虽然各种类型的血细胞计数仪已在广泛使用，但血细胞计数板法仍然是最为可靠和最为经典的计数技术，它不仅适用于血细胞计数， 还可用于其他细胞、动物血细胞、微小粒子及需要在显微镜下计数的各种样品，因此计数板仍然是检验工作者应该掌握的基本技能，是不应该忘记和放弃的手段。
随着对血细胞计数和分析需求的不断增加，对血细胞计数的方法进行改进，实现自动化、高速度、准确性、标准化和智能化的要求也越来越高，现代的血液细胞分析技术与50 年前的发明虽然有着本质上的相同或相似，但已经有了显著的飞跃。作者力图通过有限的资料对细胞计数和分析技术的发展进程进行回顾，并对最新的进展进行介绍和展望，期望对关注这一领域和从事血细胞分析工作的同行有所帮助。
一、血细胞计数仪的发展历史
谈到血细胞计数仪的发展史，在这个领域首开先河的人是1912 年出生在美国阿肯色州一个小城的人Wallance H. Coulter （图2a，b），他年青时对电子学非常感兴趣，最初是一位广播电台的电器工程师，后来做过X光机的销售员和维修工程师，在亚洲许多国家包括我国的上海工作过。1948 年他在芝加哥一家公司工作时，在一间地下室建立了自己的实验室，开始秘密的从事自己的实验，这项实验导致了一个重大的发明，他发现了微小粒子通过特殊的小孔时可产生电阻变化这一现象，并根 据这种电阻变化特点将其应用于微小粒子的粒度测量和计数上。科技界为表彰他的发明，将其称为库尔特原理（Coulter principle ）。根据这个原理，Coulter 先生将其引入到血液细胞计数上，在1953 年获得美国发明专利，同年和他的兄弟约瑟夫（Joseph ）开创了自己的公司，并成功的设计和制造出了可以计数血细胞的专用仪器，然后开始了在这一领域的商业运作。这种仪器看起来非常原始和简单，好象一个示波器另加一些管道、电极和瓶瓶罐罐（ 图3） 。它的计数原理是根据血细胞的不良导电性和产生电阻抗原理来计数血液中的细胞，也就是电阻式血细胞计数原理，这种原理现在已经成为血细胞计数和分析中最为经典的原理。
最初的血细胞计数仪是一种单参数测定仪器，只能对血液中的红细胞和白细胞进行计数，并且需人工切换。最早生产的血球计数仪为Coulter A型，笔者曾经见到和使用过Coulter D型，那是一个黑色外壳的长方型仪器，它的前面有一些调节轮盘，右下方有一个可以升降的样品台，它通过U型水银管控制计数时间和计数容量，外侧安装有一个窥孔器（用于观察计数小孔是否有堵塞的放大镜），通过数码管显示结果，通过切换按键选择白细胞还是红细胞计数的简单仪器。1958 年以Coulter 命名的专门从事颗粒性测量和计数的仪器公司，库尔特电子（Coulter Electronics ）公司成立。
