一般得到基因敲除小鼠后,首先要做的就是小鼠基因型的鉴定,一般采用PCR的方式。
获得的基因敲除小鼠种类不一样,所以采用的引物也不一样,比如我们做的全基因敲除小鼠,用neo抗性基因取代了小鼠本身的一段基因序列,这时我们一般在取代基因的位置选一对引物(引物1),在neo前选一个正向引物,反向引物在neo上选取(引物2),那么通过2次PCR的方式,野生型小鼠只能用引物1扩增出单一条带,而全敲除小鼠只能用引物2扩增出相应大小的片段,杂合子小鼠是引物1和引物2都可以扩增出相应大小的片段。
获得的基因敲除小鼠种类不一样,所以采用的引物也不一样,比如我们做的全基因敲除小鼠,用neo抗性基因取代了小鼠本身的一段基因序列,这时我们一般在取代基因的位置选一对引物(引物1),在neo前选一个正向引物,反向引物在neo上选取(引物2),那么通过2次PCR的方式,野生型小鼠只能用引物1扩增出单一条带,而全敲除小鼠只能用引物2扩增出相应大小的片段,杂合子小鼠是引物1和引物2都可以扩增出相应大小的片段。