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什么是TALEN?TALEN的原理是什么?

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一、TALEN
TALE (Transcription Activator-Like Effector) 是由植物致病细菌Xanthomonas分泌的一类具有转录激活功能的蛋白,该种蛋白通过其内部保守的重复氨基酸序列(即DNA结合域)与植物宿主基因启动子区的相应核苷酸序列发生特异性结合,并激活基因表达。
TALE的DNA结合域由一些非常保守的重复氨基酸序列模块组成,每个模块一般包含33~35个氨基酸(aa),其第12,13位氨基酸种类可变且决定了TALE与DNA结合的特异性。因此称这种重复可变的双氨基酸序列为RVD (Repeat Variable Diresidue)。
TALEN (Transcription Activator-Like Effector Nuclease) 是一种人工改造的限制性内切酶,是将TALE的DNA结合域与限制性内切酶 (FokⅠ) 的DNA切割域融合而得到。由于TALE的DNA结合域中的重复氨基酸序列模块可以与单碱基发生特异性结合,因此理论上可以任意选择靶DNA序列进行改造,是一种非常有效的基因组改造工具酶。
二、利用TALEN进行基因组编辑的原理
TALEN在细胞中与基因组的靶位点结合,形成二聚体发挥内切酶活性,导致左右TALEN的spacer区域发生双链DNA断裂(DSB,Double-Strand Breaks),从而诱发DNA损伤修复机制。细胞可以通过非同源性末端接合机制(NHEJ, Non-homologous End Joining)修复DNA。NHEJ修复机制并不精确,极易发生错误(缺失/插入),从而造成移码突变,因此可以达到基因敲除的目的


1楼2013-02-05 12:42回复
    At the end of the road, there is still more road if you're willing to walk it.


    来自Android客户端3楼2013-12-11 22:14
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      一、TALEN
      TALE (Transcription Activator-Like Effector) 是由植物致病细菌Xanthomonas分泌的一类具有转录激活功能的蛋白,该种蛋白通过其内部保守的重复氨基酸序列(即DNA结合域)与植物宿主基因启动子区的相应核苷酸序列发生特异性结合,并激活基因表达。
      TALE的DNA结合域由一些非常保守的重复氨基酸序列模块组成,每个模块一般包含33~35个氨基酸(aa),其第12,13位氨基酸种类可变且决定了TALE与DNA结合的特异性。因此称这种重复可变的双氨基酸序列为RVD (Repeat Variable Diresidue)。
      TALEN (Transcription Activator-Like Effector Nuclease) 是一种人工改造的限制性内切酶,是将TALE的DNA结合域与限制性内切酶 (FokⅠ) 的DNA切割域融合而得到。由于TALE的DNA结合域中的重复氨基酸序列模块可以与单碱基发生特异性结合,因此理论上可以任意选择靶DNA序列进行改造,是一种非常有效的基因组改造工具酶。
      二、利用TALEN进行基因组编辑的原理
      TALEN在细胞中与基因组的靶位点结合,形成二聚体发挥内切酶活性,导致左右TALEN的spacer区域发生双链DNA断裂(DSB,Double-Strand Breaks),从而诱发DNA损伤修复机制。细胞可以通过非同源性末端接合机制(NHEJ, Non-homologous End Joining)修复DNA。NHEJ修复机制并不精确,极易发生错误(缺失/插入),从而造成移码突变,因此可以达到基因敲除的目的


      4楼2017-07-17 15:43
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        TALEN 技术(Transcription activator–like effectors)是一种崭新的分子生物学工具。科学家发现,来自植物细菌Xanthomonas sp.的TAL蛋白的核酸结合域的氨基酸序列与其靶位点的核酸序列有恒定的对应关系。利用TAL的序列模块,可组装成特异结合任意DNA序列的模块化蛋白,从而达到靶向操作内源性基因的目的。目前TALE 技术主要应用:Knock-out、Knock-in片段或点突变。


        5楼2017-07-17 15:46
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