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基因型鉴定时,鼠耳DNA的提取方法?

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答:(1)先配制成10×母液,分别于试剂瓶中常温保存: 100mM NaOH ; 1mM EDTAPH 8.0;
(2)两种母液混合并至各自浓度均稀释了10倍,配制成使用液(现用现配),每个鼠耳样品加300ul裂解液
(3)95℃ 加热10分钟
(4)降至室温,直接吸取裂解液上清4ul作为模板,进行PCR检测
(5)鼠耳DNA溶液在-20℃保存


1楼2013-02-05 12:54回复
    此方法重复性欠佳。而且要求对鼠耳的质量较高。如果不是新鲜现取鼠耳(eg:-80°保存隔夜鼠耳)或不是裂解后马上PCR(eg:4°保存次日PCR)均得不到较好结果。而且浓度很低。不知LZ是拿什么95°10min?我用水浴锅(实际温度计显示93°)95°10min。效果不好呀,求解!


    2楼2013-02-08 23:58
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