质粒DNA经转染进入细胞后,仅有一部分被转运到细胞核内进行转录并最终输出mRNA到细胞质进行蛋白合成。转入基因的表达通常可以在1-4天内可以检测到。一周后,由于大部分外源DNA会被核酸酶降解或随细胞分裂而稀释,因此,也就检测不到其存在了。转染可以分为瞬时转染和稳定转染。瞬时转染(transient transfection)指的是转染的核酸不整合到染色体上,结果是短暂的高水平表达,可在24—96小时内检测表达效果,表达水平与位置无关,不会受到周围染色体元件的影响。瞬时表达分析所需的人力和时间比稳定转染少,但因为DNA摄入效率和表达水平在不同实验中差异较大,不长久也不稳定。超螺旋质粒转染更倾向于瞬时表达。瞬时表达适合研究启动子等调控元件。稳定转染指的是转染的质粒DNA整合到染色体上,或者相当于附加子(episome)可持续存在,使得转染的细胞可长期表达。外源基因整合的几率很小,要获得稳定转染的细胞株,通常需要有筛选标记(比如抗性基因)共同转染,通过选择压力维持表达的稳定,不能通过的就被干掉了。质粒整合到染色体上本来就是件稀罕事儿,平均万分之一的几率,如果是线性化DNA转染,那整合的几率就高多了。不过再怎么整合也就是一个或者有限的几个拷贝,所以表达量往往不会太高。但是,“压倒一切的是'稳定'”,很多时候,转染后往往要进行稳定表达的筛选。例如,常用G418进行筛选,用以获得稳定的细胞系。