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条件性基因敲除能不能直接去Loxp,不去Neo?

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条件性基因敲除主要是通过染色体位点特异性重组酶系统Cre-LoxP和 FLP-frt来实现的。想达到的目的是只有某个组织或者某个时间内,该基因条件性地敲除不表达,而在其他组织和时间内都是正常表达的。如果得到F1代杂合子小鼠后,直接和组织特异性Cre小鼠交配,那么就实现了特异的组织中该基因的敲除,其它组织中该基因仍含有Loxp和Neo,不能精确地模拟野生型,Neo的引进也可能引起一些表型,以干扰实验结果。


1楼2013-07-10 10:12回复
    条件性基因敲除主要是通过染色体位点特异性重组酶系统Cre-LoxP和 FLP-frt来实现的。想达到的目的是只有某个组织或者某个时间内,该基因条件性地敲除不表达,而在其他组织和时间内都是正常表达的。如果得到F1代杂合子小鼠后,直接和组织特异性Cre小鼠交配,那么就实现了特异的组织中该基因的敲除,其它组织中该基因仍含有Loxp和Neo,不能精确地模拟野生型,Neo的引进也可能引起一些表型,以干扰实验结果。


    来自Android客户端4楼2013-12-09 17:22
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      为什么一开始要neo呢?它存在的目的是?


      5楼2016-01-20 21:59
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        不行。因为即使不引入neo,在构建打靶载体的时候也得引入別种的标记基因。到时也可能会出现您所担心的现象。其实相对于您所担心的现象,不引入neo基因更有可能导致您无法确定所构建的打靶载体是否正确载入了目的基因和与细胞内靶基因特异片段同源的DNA分子,对实验准确性的影响更大。


        6楼2017-09-07 11:30
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