三、确证试验
经过预备试验，如果检材呈阳性反应，说明有血迹存在的可能性，需进一步进行确证试验，以明确是不是血迹。与预备试验相反，确证试验特异性强，但灵敏度较低，如果检材条件差，如经日晒雨淋、混有杂质或已腐败的血迹，则难以出现阳性反应。因而确证试验的阳性结果可以肯定为血迹，阴性结果却不能完全排除血迹存在的可能性。确证试验的方法也很多，如血色原结晶试验、氯化血红紫结晶试验和光谱检查等。
1．血色原结晶试验
血迹中的血红蛋白，在碱性溶液中分解成正铁血铁素和变性珠蛋白，再与还原剂作
用，正铁血红素还原成血红素，与变性珠蛋白或者其他含氮化合物结合可生成血色原结晶。根据这一原理进行试验，利用血色原结晶出现情况就可以确定是否血迹。试验时，先用10％氢氧化钠水溶液3毫升，吡啶3毫升和30％葡萄糖水溶液l0毫升混合配制成试剂。取少量检材，置于载玻片上，加所配试剂1—2滴，盖上盖玻片，梢加热至冒小气泡，冷却后镜检。如为血迹，可出现樱红色针状、菊花状或星状血色原结晶。
2．氯化血红素结晶试验
血液中血红蛋白用酸作用破坏球蛋白，生成正铁血红素，与冰醋酸、氯化钠作用，
则生成游离氯，正铁血红素与游离氯作用生成褐色菱形氯化血红素结晶。根据达一原理，试验时，先用10％氯化钠溶液2毫升，冰醋酸10毫升和无水酒精5毫升配制试剂，取检材少许，置于载玻片上，加试剂1—2滴，盖上盖玻片，稍加热，待冷却后镜检。如系血迹，可见到褐色菱形结晶。
3.光谱检查
日光通过有色液体时，其中某种波长的光线被吸收，在光谱上出现条状阴影的吸收
线。血迹中血红蛋白及其衍生物均为有色物质，有很强的选择吸收光谱的性能，具有特定的吸收线。根据这一特性，用显微分光镜检查，可以鉴别是否血迹。光谱检查，灵敏度高，简便易行。
经过预备试验，如果检材呈阳性反应，说明有血迹存在的可能性，需进一步进行确证试验，以明确是不是血迹。与预备试验相反，确证试验特异性强，但灵敏度较低，如果检材条件差，如经日晒雨淋、混有杂质或已腐败的血迹，则难以出现阳性反应。因而确证试验的阳性结果可以肯定为血迹，阴性结果却不能完全排除血迹存在的可能性。确证试验的方法也很多，如血色原结晶试验、氯化血红紫结晶试验和光谱检查等。
1．血色原结晶试验
血迹中的血红蛋白，在碱性溶液中分解成正铁血铁素和变性珠蛋白，再与还原剂作
用，正铁血红素还原成血红素，与变性珠蛋白或者其他含氮化合物结合可生成血色原结晶。根据这一原理进行试验，利用血色原结晶出现情况就可以确定是否血迹。试验时，先用10％氢氧化钠水溶液3毫升，吡啶3毫升和30％葡萄糖水溶液l0毫升混合配制成试剂。取少量检材，置于载玻片上，加所配试剂1—2滴，盖上盖玻片，梢加热至冒小气泡，冷却后镜检。如为血迹，可出现樱红色针状、菊花状或星状血色原结晶。
2．氯化血红素结晶试验
血液中血红蛋白用酸作用破坏球蛋白，生成正铁血红素，与冰醋酸、氯化钠作用，
则生成游离氯，正铁血红素与游离氯作用生成褐色菱形氯化血红素结晶。根据达一原理，试验时，先用10％氯化钠溶液2毫升，冰醋酸10毫升和无水酒精5毫升配制试剂，取检材少许，置于载玻片上，加试剂1—2滴，盖上盖玻片，稍加热，待冷却后镜检。如系血迹，可见到褐色菱形结晶。
3.光谱检查
日光通过有色液体时，其中某种波长的光线被吸收，在光谱上出现条状阴影的吸收
线。血迹中血红蛋白及其衍生物均为有色物质，有很强的选择吸收光谱的性能，具有特定的吸收线。根据这一特性，用显微分光镜检查，可以鉴别是否血迹。光谱检查，灵敏度高，简便易行。
