.凝集素的研究进展
3.1凝集素的定义及分类
凝集素在本质上属于蛋白质或糖蛋白,是一类非免疫性的球蛋白,它能够与细胞表面的糖链发生可逆的特异性识别,并能够结合到杂糖复合物的糖链上,但是却不改变其糖链上糖基的共价键结构[21]。凝集素在动植物及微生物体内都有分布,目前关于凝集素的研究逐渐增多,发现的凝集素的种类也不断增加。生物凝集素按来源包括动物凝集素,微生物凝集素、植物凝集素,在整个生物界都有广泛分布 [22]。
3.2海藻凝集素研究现状
20世纪70年代以来,国内外已有近23 种海藻凝集素被分离纯化出。海藻凝集素的功能也逐渐被证实,主要研究集中在海藻凝集素凝集细胞的活性[23],促进淋巴细胞间的转化上[24],以及在水产动物机体免疫上的促进作用上,这也为海藻凝集素作为水产动物免疫增强剂提供了一定的理论基础。
3.2.1不同海藻凝集素对水产动物免疫影响的研究
(一)裙带菜凝集素对日本对虾和鲫鱼的免疫活性影响
为了检测外源凝集素对日本对虾(Penaeus japonicus)免疫活性的影响,给日本对虾注射外源裙带菜凝集素,研究结果可发现在注射裙带菜凝集素后,日本对虾血清的凝集活性以及各种免疫酶的活性都有提高,如酚氧化酶活性(proPO )、超氧化物歧化酶活性(SOD)、碱性磷酸酶活性(AKP)、溶菌酶活性(LYS)都有提高,即注射裙带菜凝集素后可以明显提高日本对虾的非特异性免疫力[25]。
外源凝集素的注入对鲫鱼免疫系统也有重要作用,如血清中的凝集素活性明显提高,因而也提高了鱼体自身的免疫防御体系。并且随着裙带菜的注入,鲫血清中溶菌酶,超氧化物岐化酶,过氧化氢酶(CAT)活性都明显提高,说明在裙带菜凝集素的诱导下,鲫自身的保护能力增强[26]。
(二)孔石莼和条斑紫菜对鲫鱼免疫活性的诱导作用
在测定外源凝集素对鲫的免疫系统影响时,对鲫进行投喂和灌喂孔石莼和条斑紫菜凝集素进行对比,结果显示鲫血凝活力得到提高,推测可能是外源凝集素促进了鲫鱼细胞凝集素的合成或对鲫鱼凝集素具有激活作用[27]。此外鲫免疫系统中的各种活性酶,如溶菌酶,过氧化氢酶,超氧化物歧化酶的活性都有一定程度的提高。这也说明外源凝集素的注入都有提高鲫鱼的免疫水平的作用,使其血清免疫系统得到激活[28]。
(三)萱藻凝集素对刺参免疫酶活性的影响
刺参属于无脊椎及棘皮动物,不存在一些在脊椎动物中发现的获得性免疫机制,因此非特异性的免疫机制在刺参的免疫系统占据重要位置。其中包括体壁防御机制和体内免疫机制[29-30]。体内免疫机制主要由细胞免疫和体液免疫构成,无免疫组织和各种免疫器官,所以体腔细胞在细胞免疫和体液免疫中发挥重要作用[31]。有效清除入侵刺参体腔液的外源病原体时,体腔细胞也具有一定的作用。同时刺参体腔液中含有的各种活性酶如酸性磷酸酶,碱性磷酸酶,溶菌酶,过氧化氢酶在体内免疫中都发挥一定的作用[29]。用40-45℃烘干,从萱藻中分离出萱藻凝集素,检测出萱藻凝集素具有较高的活力。将萱藻凝集素和裙带菜分别与刺参的基础饲料混合来投喂刺参,结果为裙带菜凝集素和萱藻凝集素都能显著提高以上四种酶的活性,且最高酶活的最佳凝集素浓度和诱导时间不同[32],说明海藻凝集素能作为一种天然的免疫增强剂并对刺参机体具有显著的免疫诱导作用。
3.1凝集素的定义及分类
凝集素在本质上属于蛋白质或糖蛋白,是一类非免疫性的球蛋白,它能够与细胞表面的糖链发生可逆的特异性识别,并能够结合到杂糖复合物的糖链上,但是却不改变其糖链上糖基的共价键结构[21]。凝集素在动植物及微生物体内都有分布,目前关于凝集素的研究逐渐增多,发现的凝集素的种类也不断增加。生物凝集素按来源包括动物凝集素,微生物凝集素、植物凝集素,在整个生物界都有广泛分布 [22]。
3.2海藻凝集素研究现状
20世纪70年代以来,国内外已有近23 种海藻凝集素被分离纯化出。海藻凝集素的功能也逐渐被证实,主要研究集中在海藻凝集素凝集细胞的活性[23],促进淋巴细胞间的转化上[24],以及在水产动物机体免疫上的促进作用上,这也为海藻凝集素作为水产动物免疫增强剂提供了一定的理论基础。
3.2.1不同海藻凝集素对水产动物免疫影响的研究
(一)裙带菜凝集素对日本对虾和鲫鱼的免疫活性影响
为了检测外源凝集素对日本对虾(Penaeus japonicus)免疫活性的影响,给日本对虾注射外源裙带菜凝集素,研究结果可发现在注射裙带菜凝集素后,日本对虾血清的凝集活性以及各种免疫酶的活性都有提高,如酚氧化酶活性(proPO )、超氧化物歧化酶活性(SOD)、碱性磷酸酶活性(AKP)、溶菌酶活性(LYS)都有提高,即注射裙带菜凝集素后可以明显提高日本对虾的非特异性免疫力[25]。
外源凝集素的注入对鲫鱼免疫系统也有重要作用,如血清中的凝集素活性明显提高,因而也提高了鱼体自身的免疫防御体系。并且随着裙带菜的注入,鲫血清中溶菌酶,超氧化物岐化酶,过氧化氢酶(CAT)活性都明显提高,说明在裙带菜凝集素的诱导下,鲫自身的保护能力增强[26]。
(二)孔石莼和条斑紫菜对鲫鱼免疫活性的诱导作用
在测定外源凝集素对鲫的免疫系统影响时,对鲫进行投喂和灌喂孔石莼和条斑紫菜凝集素进行对比,结果显示鲫血凝活力得到提高,推测可能是外源凝集素促进了鲫鱼细胞凝集素的合成或对鲫鱼凝集素具有激活作用[27]。此外鲫免疫系统中的各种活性酶,如溶菌酶,过氧化氢酶,超氧化物歧化酶的活性都有一定程度的提高。这也说明外源凝集素的注入都有提高鲫鱼的免疫水平的作用,使其血清免疫系统得到激活[28]。
(三)萱藻凝集素对刺参免疫酶活性的影响
刺参属于无脊椎及棘皮动物,不存在一些在脊椎动物中发现的获得性免疫机制,因此非特异性的免疫机制在刺参的免疫系统占据重要位置。其中包括体壁防御机制和体内免疫机制[29-30]。体内免疫机制主要由细胞免疫和体液免疫构成,无免疫组织和各种免疫器官,所以体腔细胞在细胞免疫和体液免疫中发挥重要作用[31]。有效清除入侵刺参体腔液的外源病原体时,体腔细胞也具有一定的作用。同时刺参体腔液中含有的各种活性酶如酸性磷酸酶,碱性磷酸酶,溶菌酶,过氧化氢酶在体内免疫中都发挥一定的作用[29]。用40-45℃烘干,从萱藻中分离出萱藻凝集素,检测出萱藻凝集素具有较高的活力。将萱藻凝集素和裙带菜分别与刺参的基础饲料混合来投喂刺参,结果为裙带菜凝集素和萱藻凝集素都能显著提高以上四种酶的活性,且最高酶活的最佳凝集素浓度和诱导时间不同[32],说明海藻凝集素能作为一种天然的免疫增强剂并对刺参机体具有显著的免疫诱导作用。