【7.5】
今天是个漫长的日子
原因就是，起得早……
明明应该倒时差，但睡了不到7个小时就感觉睡得差不多了
早晨5点天就大亮
之后窗外就开始传来消防车的警笛声
【这附近可能有消防站，一天到晚出警x
8点起来，起床的原因其实是，收到了joshua的邮件，起床开电脑回复之
因为joshua去TCP（好像是叫这个，实验室不让养小鼠，所有活体的操作都要在那边完成）
所以约了11点见面，上午就比较空闲
先去吃了个早饭，在一个连锁的咖啡馆Tim Hortons，服务员迷之口音根本听不懂，不过培根芝士bagels还是挺赞的
不过3刀也不便宜……
之后去找超市……在地图上看到个综合商场，结果发现果然是商场，都是买衣服的……只好去舍友们说的Metros
在综合商场反方向，和综合商场关于宿舍对称……mdzz
超市倒是的确不错，蔬菜水果面包肉食零食饮料都齐全，可以买菜买肉回去自己做饭
这边牛奶居然又有论袋卖的，几袋装一盒，就是像外面小摊卖的豆浆一样
接受不了，还是买2L纸盒的好了
此外还看到了10L装的纯净水，就像一桶汽油一样（x
刷卡的时候，也各种闹笑话，这边刷卡不用密码，是插卡然后点确认就行……刷磁条不好用
拎着2大桶饮料回到寝室，收拾了一下
室友们都出发了，寝室里只有我一个人
手贱点了ipad的升级，结果就只能坐在那干等着，怕ipad升级完成不了变成砖……
10点钟再度启程，先去多伦多大学，找到medical science building
多伦多大学挺有趣的，整个大学对外开放，甚至路就穿过校园
大学有很多学院，有的学院会搞成独栋别墅的样子，比较少见
石头建筑古朴厚重，韵味十足
其实路还是挺好找的，因为现在养成了好习惯，特别注意路的名字和方向，地图也背熟了
另外我在家就已经把King's Circle那里的路用谷歌地图的实景看过了，路也都找好了，这次去的确轻车熟路
department of molecular genetic就在那栋楼的4层（ground floor其实是2层，也就是说爬2层楼……）
这楼楼道很宽，铺着米黄色的瓷砖，两旁都是铁门，门上的玻璃都有铁网保护
要不是从窗户能看到里面的实验台和各种仪器，会有种自己走进劳教所或者疯人院的感觉……
在那里找到学生助理colleen，从她那里获得了工资支票
1600刀的工资，怕是cover不了在加拿大的花费啊，尽管学校连住宿都包了……
发邮件的时候，一直以为Colleen是个男的，没想到是年轻女性，还好邮件里没用Mr. Colleen（x
从多大出来，就前往约见的地点
找路还是花了些功夫
sickkids是一家综合医院，而我实习的地方是研究机构，名叫Peter Gilgan Centre for Research and Learning，简称PGCRL，是栋20多层的大厦，有种办公楼的感觉，但里面都是实验室
想想过去2年都在王克贞的4层小楼里做实验，觉得出来见见世面真好
在大厅等到了joshua【手机没网，又打不了电话，只能干等，还好Joshua按时赶到
joshua带着我逛了一下我所在的Xi Huang lab
大部分东西，都和我预计的差不多
实验台和王克贞的感觉差不多，很宽敞明亮，各种耗材充足，buffer都眼熟，抽屉上标注了里面的物件，冰箱也分配到了个人，还挺适应的
不过细胞培养室和进行特殊操作的cold room还挺新鲜的
冰箱都集中在一个房间，但走廊中也有散在得-80，而4度冷柜和-30都在实验室内，其实空间还挺紧俏的
不过xi huang的人在15、16层都有实验台，毕竟又要做小鼠又要做果蝇
这边的量筒、量杯、玻璃制品都集中在一个房间的架子上，也有雇专人清洗和灭菌
之后跟着joshua坐了下荧光免疫染色
早上他去切了小鼠脑片，染了一抗
然后回来清洗
脑片是放在载玻片上，一个片上有4个脑片，用一个长方形的盖玻片盖好的
wash之前要先把盖玻片弄掉，但又要小心波能弄坏脑片，所以只能在PBST中用力晃，再拿出来用力甩
按joshua的话说，实验做得快不快“depends on whether they‘re cooperative”
甩装片多的时候一个要2分钟，少的时候半分钟
加上5min洗6次，感觉各种浪费时间
结果昨晚洗脱孵上二抗准备吃饭的时候，已经是中午1点多了
这边实验室的二抗和我们那边用的不太一样，毕竟是荧光抗体，除了α-mouse、α-rabbit，还有α-chicken和rat
后面的数字就代表了发射波长，555表示红光，647表示远红光，还有绿的、蓝的等
1：500稀释比，不用牛奶而是用了奇怪的buffer……
joshua的课题是，研究钾离子通道KCND和神经胶质瘤的关系
他们发现SOX2高表达的干细胞癌变形成的癌细胞分裂缓慢，因此抗肿瘤药物不好使
而neural progenitor分裂迅速，容易被药物抑制
于是他们设想，是否可以促进SOX2高表达的癌细胞分化成neural progenitor以便治疗呢？
他们已经初步确定KCND可以影响SOX2高表达line的分化
所以就做了KCND deficient的line
brdU是细胞增殖的检测物，neural progenitor分裂迅速，会大量摄入brdU
而SOX2 line摄入很少，但被促进分化的SOX2 line初步分化，分裂加快，也会大量摄入brdU
所以就要用免疫荧光看KCND的突变体与野生型brdU的摄入量是否有区别
在楼下吃了个三明治当午餐，店员居然是中国人
口音还挺明显的，但口语很6，发现我英文磕磕巴巴就直接跟我讲国语了233
下午回去歇了一会，然后把二抗拿出来，洗脱，加dapi，洗脱备用
据joshua说，dapi的作用是，指示癌细胞用
癌细胞分裂周期短，所以细胞小而剧团，细胞核又大形状又异常
下午3点本来是组会，但老板xi huang还没度假回来，所以组会鸽了
不过有好事，每周三都有free coffee喝，整个lab的人可以坐在一桌唠唠家常
xi huang是土生土长中国人，但能在这边当PI，还是有点实力
实验室的7个人中也有4个是中国人……只不过大家互相也只讲英文，口语也好得一比

coffee break之后，在15楼玩了会果蝇
首先是搜集3龄幼虫（instar III），然后在荧光显微镜下观察脑中的荧光
最后挑出一部分幼虫把脑解剖出来
果蝇的脑能看到的就是2个lobe和一个ventral nerve cord
就是8==>的形状（x
按照joshua教的方法，先把幼虫从中部撕成两半，有黑色的嘴的那一端就是头
然后撕烂头的外皮，在一堆管状的组织中翻出脑，其实只要看到脑的2个lobe就好弄了
joshua给了我5个不用的larva练练手，刚开始搞废了2个，有一个叫joshua帮忙了，后面2个大成功
现在觉得果蝇幼虫还挺萌的，肉肉的，扭来扭曲，在体式镜下看，能看到口器一伸一缩地在吃东西，被镊子夹住的时候还会用力缩短，然而没卵用，还是会被我无情地生生揪成2段，内脏都爆出来了
joshua做果蝇也是为了模拟脊椎动物中的神经胶质瘤
用了一个在神经细胞中特异表达的inscutable（insc）启动子带GAL4
然后用UAS-GAL4系统，在神经细胞中过表达癌基因
过表达癌基因的果蝇，脑会肿大
KCND在果蝇中的同源物是Shab，RNAi knockdown Shab会让果蝇脑的体积减小，也会增加果蝇存活时间
表达癌基因的果蝇死得早，纯合致死要用balance（平衡致死系），然后筛选的时候，就要选没有balance表型的幼虫，这样就是纯合致死的幼虫
weep是浑身散在的绿色荧光，Tm6-B（Tubby）是幼虫短粗，成虫胸部刚毛多……等等
3个染色体上分别都要构建平衡致死系统，还要RNAi，还要转基因，感觉系统真是复杂orz
光是原理都要想半天才大概明白……
做完实验已经7点了，出来之后本来想去Bank of Montreal开户存工资支票，后来发现周三BMO只开到6点……
不过路上看到了一家Bell，就进去把手机卡办了，店员是个大胡子，手臂上毛发很重，但很热心
40刀，300分钟通话，短信不限不收费； 25刀，1G流量+送2G流量，我觉得这个手机资费在国内简直爆炸
关键是，一用发现，根本连不上移动数据……？？？
感觉被坑了，或许是手机不支持，或许是因为我把移动的sim卡插在slot1了，准备明天再去次bell把这个问题修复
接下来去早上探路时看到的seven-eleven买了吃的，虽然有米饭炒菜的冷冻速食，但居然要6刀的天价……
早上探路时还看到一家蔬菜水果店，结果晚上走近一瞧，发现正在改造施工，7号才营业
想转头去Metro，后来一想Metro估计水果都卖没了，算了……
回去想凑合一下，不过室友有个会做饭的，简直6得飞起
给了拨了点他做的彩椒炒肉【这还好，据他说，他还做了牛排和别的菜，简直666
这室友是去年暑假来暑研的，因为表现优秀，今年又被叫来帮忙了，但其实他已经申了别的大学
吃完晚饭，又累又困，瘫在床上不想起来，但终究征服困意，起来写了这个_(:з)∠)_
这边有种迷之陌生感
可能因为周围都西方人的面孔吧
高楼大厦真的有如钢铁森林一般，尤其是人行道不宽，摩天大楼就在眼前，冲击感很强烈
不过也有些亲切之处
这边的麻雀也很多，不怎么怕人，但仔细看，和中国的麻雀配色略有差别，这边麻雀发灰
另外植物也很熟悉，道旁种了不少枫树，大概加拿大就是喜欢枫叶吧
不过也有不少椴树，叶状苞片很明显
花坛里种的玉簪、落新妇、车轴草、扶芳藤等等，也是熟悉面孔
尤其是那些野草——快有一人高的大蓟、角果长得一比二月兰，简直和北京如出一辙233

街景，MoGen的走廊，有轨电车，从16层的落地窗往外看，松鼠

道中的花，中午吃的迷之chinese food 还不如舍友做的好吃…
以及有了4g真是爽，3个g已经是最小的套餐了 花钱图个安心呗

完美午餐； 果蝇的脑，技巧熟练w；傍晚居然下暴雨了，明明另一边还是夕阳…

街景还是挺不错的 尤其是摩天楼鳞次栉比的压迫感 在国内比较少见…

继续街景，以及随手画了张…这几天步数分分钟破万，往返于住地和PGCRL之间保底1w步…

昨天的一桌满汉全席

【7.10】
因为今天可能要开始做细胞实验
早上起来拼一枪看论文
以往起床之后可能看看群看看狼辛，等待困意消除
今早不仅起得早，而且只能硬着头皮读论文
读了Martin发给我的关于GBM的综述
又在PDB查了查那几个ion channel的annotation
8点钟 错峰吃早饭
那个沙拉放得有点久了，不过看起来还没有蔫也没有坏，就凑合吃了点
浇上沙拉酱，就着面包吃还可以
那个Almond milk没想到真是杏仁味的调制乳
那之前喝的那盒coconut味的岂不是椰子+杏仁，感觉很黑暗啊……
天空中乌云翻滚，空气潮湿阴冷，一副要下雨的样子，然而终究没有下，而且云还听漂亮的
早上又换了条路走，从Queen‘s Park东边过去的，参考了上回的教训，估计快到Bay st.就转向南走了
结果差点迷路了（
嘛 每天换换路走还是挺有新鲜感的
路上想了想研究计划
到了sickkids，有点早，就写了研究计划
CZX10点左右到了，而10点半才终于等到josh
上午josh给我和CZX讲了讲果蝇的一些phenotype，比如Sp、Tm6B、Tm2，还有如何分辨雌雄、分辨virgin
那些靠某部位刚毛（bristle）数目来区别的性状真是难区分……takes practice_(:з)∠)_
分辨雌雄，其实也有点难度，大抵就是雌性是生殖孔，而雄性有突出的复杂结构
【给我们看的雌性，因为mate过了，有的都在产卵了……
virgin就是看体色，和看食物颗粒的black spot，刚孵化的果蝇颜色很淡
之后我也得到了任务，每天早晚要收集virgin，收集个三五天，一共要10只的样子
其实我挺喜欢养点什么东西，然后每天照看，这样的工作
上午的时候有几个pupa已经变成褐色了，说明很快就要孵化
然而到下午5点想走的时候，发现只孵化了一只，并且很不幸是雄的 = =……
因为上周五蠢了，忘了带走饭盒，所以中午就没有便当了……
只好再去上次去过的那家国人开的begal shop买午饭
芝士味的begal看起来有点吓人，但吃起来炒鸡香w
很快就吃完上楼，结果正好碰到CZX，就去大厅坐着聊天去了
刚聊没多久，就遇到了买饭回来的Xin和Josh，就被强行拉过去坐一起了
闲扯了些东西，然后Xin就开始问CZX各种跟实验相关的概念，问得CZX各种狼狈
感觉Xin和Josh的区别就是，Xin很有中国人那种对掌握知识的执着
比如上午讲了ECM、讲了引发肿瘤的信号分子，中午就要CZX复述一遍
上周CZX各种被Xin留下做实验，每天都折腾到7 8点
的确很累，虽然我倒是觉得尽早学到那些实验也不赖
但也让人有点喘不过气，更是一周都没空办UofT的临时Account，很蛋疼
Xin让CZX下paper，CZX说没有账号下不了，Xin问为什么没有，CZX看起来很不爽，说上周事情太多……
总而言之感觉Xin很push，果然还是Josh好……
还有个笑话，Xin给CZX讲immunestaining
但Xin的口音比较厉害
结果CZX一直以为是standing或者scanning
结果俩人折腾了半天，CZX才知道是那个意思
Xin还跟我感叹，有些东西说中文才好懂 233
下午先是和Josh谈了谈研究规划
其实和我预想的差不多，毕竟只有2个月，分子实验多一点，然后在细胞体系验证
【应该是个小鼠或者人的neural stem cell line
Josh在我的不停追问下，还跟我扯了半天细胞培养，感觉挺有意思的
之后我就放假了，因为Josh要教CZX解剖果蝇
【确切点说是Xin让CZX去学的，Xin好像不论何时都再叮嘱CZX多看多学……
我解剖得还算熟练了，就在一边看看Xi发过来的新的参考文献，写写实验规划
本来是打算做细胞培养的，但细胞是要去别的实验室取，那边好像还没交接好，所以只能暂时搁置……
Xin还要去TCP，就把CZX放了
于是5点钟我们就撤了
在附近一家大商场Canadian Tire买了点杂货
然后坐地铁回去了
地铁的收费是3.25刀/次，或者10刀买3个Token找1刀，或者20刀买6个找2刀
兜里只有10刀了，就买了仨Token，可以留着下次坐地铁用
从机场回来的时候，好像地铁没过闸机就进去和出来了，后来以为自己逃了次票，有种罪恶感
现在知道，从机场巴士站进地铁无需再买票，全程算一次3.25刀
今天坐的和那天机场回来时不同的线，绕了一点，但也能到 St.George
晚饭也很丰盛，回去的时候基本做好了
芦笋炒培根、豇豆、剩的洋葱烧牛肉以及煎饺
吃完打扫打扫，又提前做好了明天的便当
把吐司裹上鸡蛋煎了一下，再煎下培根，半个西红柿切片，加酸黄瓜，加沙拉酱，还是挺丰盛的
不过下次应该先煎培根再煎面包，而且下次应该打2个鸡蛋……
尽管如此，感觉这次的便当的确又进化了，卖相不错估计吃起来也不错w
【CZX做了俩三明治，一个是甜玉米番茄沙拉的，一个是培根煎蛋烤肉酱咸的，结果一不小心把后者掉地上了……最值钱的掉地上了，亏成马233 心疼x
回房间看看paper，摸摸鱼，一不小心又到了睡觉时间……
明天是实验室安全培训的课，所有summer student都必须参加的
其实就是划水啦，还占了做实验的时间……

【7.11】
没错，今天的主题就是，安全培训
这种必须参加而且和我们关系不大的东西，简直了……
主要就是讲讲实验室的危险物品有哪些，以及如何正确使用各种东西
血液制品和各种病原微生物、毒素都是bio-risk
我们用的Lentivirus居然是3级污染物，ssfd
不过今天留意了一下，实验室门上贴了Contamination Level 2，也就是说这里最少也会有2级污染物……
不过血液我们是不会接触啦，因为没有给我们弄小鼠的机会
教室坐得很满，Colleen给我们转发了一封邮件，大致是说我们没注册也可以听课，而且地方应该够
对方毕竟说了，some of them may not show up
结果人多到坐不下
只好从别的屋子搬椅子
不过仍然有人只好站在或坐在墙边……
这个老师完全就没有想让我们听懂的意思
语速快到爆炸，不知道她是在赶时间还是什么的……而且可能是印度人或者什么原因，发音特别靠前，导致咬字很脆生，颇有说绕口令的天赋……
听了一会就觉得好累
早上因为起得早，听了一个小时就受不了了，开始打瞌睡
我还以为边上CZX在认真读文献，后来他说他也受不了，睡过去了
下午我们就没想听，CZX边看文献边打盹，我直接睡了……
不过还是有些有意思的东西，我就写写
有个研究人员被发现得了血色素沉积症，一查发现居然是被他研究的鼠疫杆菌（Yersinia pestis）感染了，鼠疫杆菌会富集铁，结果就导致感染者体内铁变多……
还有个更劲爆的，有个人研究淋病奈瑟氏菌Neisseria，直接在实验台（benchtop）做实验，结果染病挂了
不进实验室关门整顿，研究机构还要受到罚款……
其实白求恩伤口感染，也应该算是LAI(Laboratory Associated Infection)吧
实验室这种污染物还是有点危险的
讲了讲超净台的构造，感觉挺神奇的
我们用的属于Class II Biosafety Cabinet
其中又根据排出空气的比例分为4种
都是从台子下面吸入气体然后经过细菌滤器
有的是70%吹出来，30%过细菌滤器排放到空气中
有的是50%吹出来
有的是100%排放到空气中……
好神奇啊（x
超净台里不能点明火，点酒精灯的话应该是在bench做实验的时候……
因为出现过有人在超净台先拿酒精擦拭，再点酒精灯，造成爆炸的先例
手套据说居然不能接触有机溶剂，比如用70%乙醇擦……因为可能会反应？？
另外手套要勤换，摘下一次就应该丢掉，戴着做实验20~30分钟也应该丢掉……
好吧，我觉得这几年实验都在疯狂违反加拿大的实验室规则……
上午上课到11点，去吃了美味的三明治
微波得比较久，面包热乎的倒是好吃，不过为了塞进餐盒，西红柿都挤爆了
面包吸了西红柿汁就变软了，有点影响口感，而且各种漏……
之前买的悬钩子（raspberry）我也加了一点
很酸很酸（只有少部分有点甜味），而且又籽的感觉，大部分因为微波的原因都烂掉了，没烂的口感都不错
中午闲着没事，去sickkids逛超市
sickkids简直没有点医院的样子，星巴克、热狗店、玩具店、日用品店，甚至珠宝首饰店，都有……
在日用品店买了瓶洗发水，按当地物价来说，简直便宜得要死
回去之后试着趴在桌上睡觉，未果
不过1点开始上课之后，睡得倒是迷迷糊糊，很是舒服
差点说梦话，还好快说出口的时候制止了自己（x
3点钟下课，到楼上
跟着josh配了LB培养基，反正就是LB粉末加水，灭菌由别人负责
试图配细胞培养基，但Marian在用超净台，josh就只给我看了一下recipe
接下来就是做了点DNA extraction
用的是小鼠尾巴，新鲜的……
泡在buffer里95℃煮半小时，加另一个buffer
buffer都是现用现配的……
还挺简单，比提拟南芥DNA简洁多了……
在此期间，josh也给我科普了一下genotyping的要点
原来小鼠杂交的每个性状都要做一套鉴定
虽然植物中也是这样，但小鼠的样品数相当少，有的line只有那么三五只，挑出想要的genotype可以说不可能吧
果蝇里特定组织表达是用insc-GAL4/UAS system
而在小鼠，则是用Cre
Cre是个重组酶，promoter带Cre可以使之在特定组织中表达
在目的基因两侧（flanking）插入loxP site
Cre就会切断loxP site，导致knock out
Cre这东西是在分子课和遗传课上讲过，当时觉得这个重组酶看起来好弱智啊，就没记
不过话说回来，像zinc finger这种古老的技术还在老当益壮，Cre应该在小鼠中用的也十分广泛吧
josh在做的途径说是Sonic Hedgehog，不是很熟，应该是和生长发育相关的吧
上细胞课的时候，乱七八糟的途径太多了，根本记不全，只记住了和SHH类似的Wnt/β-catenin途径……
晚上回来大厨舍友做了烤翅
这个烤翅厉害了，腌制了一整天，然后放烤箱，真的非常入味
另一个浙大的人做了一盘炒菠菜，结果没考虑到缩水，只剩了一丁点233
还有烤的奶酪肉末土豆泥，和差点被遗忘的炒虾仁（虾剥好放在一边给忘了，居然炒的时候加了点龙井茶）
晚饭可以说是一如既往地丰盛
饭后浙大的那几个人开始自己折腾第二天午饭的便当
那个茄子洋葱炒培根看起来有点黑暗，但实际上恰恰好
茄子刚开始感觉可能不熟，不过闷了一会就软了
加了老抽调色完美
之后做炒土豆片，结果勾芡大失败
他们试图用蛋清+生粉勾芡，然而太浓了，汁都收光了，就剩下干巴巴的土豆片hhh
他们做完后，我也试图做点自己想的东西
先加葱炝锅，加土豆翻炒，闷一下，等到有点变色就拿出来
然后炒鸡蛋，和洋葱，把土豆也加进去翻炒，上色，撒盐，盛到饭盒
之后把今天的剩饭放进去，又切了点奶酪，保鲜膜封好，微波2分钟，就成了奶酪拌饭，也不错
不过奶酪真是臭，手上味道挺大的……
昨晚饭收拾收拾厨房，心满意足，回到房间开始划水=w=

午饭的三明治，卖相不错；明天的午饭，希望好吃…有奶酪应该好吃吧…；第一次挑到处女果蝇，顺便 左边那只是处男果蝇233

【7.12】
早上依然是赶去听biosafety讲座
教室特别小，导致有一半的人没有座位
最后又折腾换教室……
这回换了老师讲，的确容易接受一点了
然而还是耐不住困意……
坐在我左前方是个日本人（看电脑界面看出来的）全程在那点头
其实前排还有个睡得更彻底的，直接趴桌上了，老师也是一脸无奈……
上午讲的是确切点说是如何安全使用化学试剂
就是先科普了一堆法律文件
然后介绍试剂标签
最后介绍了一下通风橱（fume hood）
原来通风橱上显示的风速是告诉使用者气流强度的……
风速太快或者太慢都影响通风橱内的空气流动
我还以为和超净台是一样的……
【讲的应该不止这些，不过被我睡过去了
开课前折腾到9点半，11点下课，讲得超快……老师语速还不快，或许是内容真的少
比较谐的是讲到一半突然overhead page响了
然后说Code Red sickkids zone 4……看起来sickkids医院那边某个地方着火了（
然而老师一脸淡定，大家也就继续上课了
中午去了趟实验室，倒了板子准备下午用
依然是没有做细菌的超净台
只能对着酒精灯倒板子……
我感觉他们carb的稀释倍数是1：1000，而我之前在实验室都是用的1：10000……
之后是lab meeting
老板换了个头型，从背后都没认出来，毕竟年轻PI，发型也很时尚233
lab meeting真的如传说中的那样，有饭吃！
今天的是一份咖喱，一份烤鸡和一份炒饭，一看就很好吃
【哎，现在写到都觉得饿QAQ
大家就边听组会边吃，只有讲的人比较可怜，没得吃，还要被人质问hhh
这回讲的人是Jerry Fan
jerry的data不少都是josh做的，另外也有martin的，能看出来，他们经常一起行动……
jerry特意多讲了一点background，还是让我了解了不少他的课题的来龙去脉的
其实他就是根据Xi的文章，发现成胶质细胞瘤（glioblastoma）肿瘤细胞中某个离子通道的表达很高，而且如果突变掉这个离子通道，肿瘤体积就会缩小
jerry于是用小鼠进行了实验，免疫荧光染色发现，突变掉离子通道后，表达SOX2的细胞减少了，也就是说未分化的细胞减少了
不过其实这里有点tricky，肿瘤体积减少应该说明细胞数目的减少（可以观察到不是细胞体积减小），而表达SOX2的tumor stem cell大多数处于quiescent状态，对肿瘤的体积贡献不大，所以其实已经分化的neural progenitor可能贡献更大？
neural progenitor的两个marker基因，DCX和NeuN
他们好像很喜欢免疫荧光……
反正看起来jerry接下来的工作就是排除法，一个个假设进行排除，最后确定这个通道的工作原理
现在已知，不是加快SOX2细胞的细胞周期（因为加入5-溴尿嘧啶/BrdU，并没有发现敲除通道后有更多信号），也不是增加凋亡（好像是用抗体杂caspace染色的？）
还有些别的假设，都是些分子实验，还好，只不过小鼠实验比较复杂，周期也长……
组会开完，刚好到了下午听课的时间
下午的课在sickkids那边的Hollywood Theater上
因为椅子舒服，空间也大，睡得真是香=w=
睡了一个小时，之后在醒盹的时候，课就结束了……提前了40分钟？？？
睡眼朦胧就回到实验室
下午把冻的菌拿出来活化涂板
先从stock里吸一些出来，摇了半个小时
每次取菌液还要在酒精灯边上烧一烧，手感觉好烫_(:з)∠)_
趁机去挑virgin，依然没有处女蝇，只有3只处男= =
明明那么多发黑的pupa……
【出于好奇，在体式镜下看了看pupa，白pupa就是幼虫的形态，还能看到黑的口器，而黑pupa已经初具成天果蝇的雏形，能看到红色的眼睛和胸部的甲壳了，黑色就来自甲壳中的色素，另外还近距离观察了一下蠕动的幼虫
摇完菌，离心去除上清，再重悬
亮点来了，这边没有超净台，也没有涂布器
涂布用的东西是拿一根玻璃毛细管，在酒精灯上烧热之后轻轻掰弯的，简直像制作玻璃工艺品一样，惊了个呆
然后整个涂板子过程就像高中生物书上讲的一样，还要烧一烧涂布器之类的……麻烦得一比
我试图按照之前的习惯，掰弯枪头来涂布
不过毕竟资本主义国家，枪头都那么硬，第一次掰枪头飞了，还好移液器没坏……
后来用手才勉强掰动
枪头也挺好用的，代替炒鸡易碎的毛细管涂布器很不错……
不过可能因为比较晚了，饿了，精神不集中，加上不熟练，好几次忘了标板子的编号
只能去翻废液桶里丢进去的管子，一个一个和已经标记的板子对比，找出没标记的那个……
折腾了几回心力交瘁，也浪费了不少时间
最后决定先放4℃，第二天再弄……
晚上走回来又累又饿，还好路上一边听歌一边厄介，充满干劲就回去了
只有4个人吃，今天是GZG和隔壁的PKL烧菜，此外还有MHH
4个人吃4个菜，看起来奢侈，但每个菜量略少，比如烤鱼，只有2块，其实是不够吃，最后只能米饭拌辣酱
吃完饭等着FCZ回来洗碗，结果晚上10点了还是我们4个，别人都没回来
于是盘子锅子杯子碗都丢在那，没人收拾
在客厅练天体驱动，看着水槽里堆得满满的，不爽，就干脆一个人动手收拾
后来他们陆续回来了，也帮我收拾了一点……
折腾半天收拾完了，又顺手把第二天午饭的便当做了——
先煸香葱蒜，加鸡蛋翻炒，然后是培根丁，接下来放豆芽和洋葱，快炒
加老抽上色，加盐，加豆瓣酱，趁豆芽和洋葱还脆就起锅
尝了尝有点单调，就又加了点番茄酱，完美！
做完饭洗个澡已经半夜了……
哎，时间过得真快QAQ
很困，而且明天没有上课时间补觉了_(:з)∠)_

今天的炒饭；窗外阴云密布