操作方法 ：
裂解蛋白的所有步骤都需在冰上或 4℃进行。
一 、 对于体外培养细胞 ：
1．根据用量取适当的浆蛋白抽提试剂和核蛋白抽提试剂加入 PMSF，使 PMSF 的最终浓度为 1mM。PMSF需现用现加，若目标蛋白含有丰富的半胱氨酸，可以在两种蛋白抽提液中加入 DTT 至终浓度 0.5mM。
2．对于贴壁细胞，去除培养液，用 PBS 洗一遍，用细胞刮刀收集细胞，或用 EDTA 消化后吹打下细胞（最好不用胰酶硝化，以免胰酶消化目的蛋白） 。500 g 离心 2～3 分钟收集细胞，吸尽上清留下沉淀备用。
3．对于悬浮细胞：用 PBS 洗一遍，500 g 离心 2～3 分钟收集细胞，吸尽上清，留下细胞沉淀备用。
4．每 20ul 细胞沉淀加入 200ul 浆蛋白抽提试剂（2×10 6 个细胞沉淀约 20ul 或 40mg） 。
5．用移液器吹打或高速涡旋 15 秒（可适当延长） ，必须使细胞沉淀完全分散开成单细胞悬液。细胞沉淀分散不完全会导致蛋白产量降低。
6．冰浴 10 分钟。
7．最高转速剧烈涡旋 10 秒，4℃ 12000～16000g 离心 10 分钟。
8．上清即为抽提得到的细胞浆蛋白，立即吸取上清至预冷的样品管中备用，进行后续的 PAGE、Western 等实验，但蛋白浓度较低，可根据需要进行相应浓缩。
9．沉淀即为细胞核，要完全吸尽残余的上清（避免细胞浆蛋白的污染） ，加入 50-100ul 核蛋白抽提试剂。
10．用移液器吹打或高速涡旋 15 秒（可适当延长）至沉淀完全分散，冰浴 10 分钟。
11．最高转速剧烈涡旋 10 秒，4℃12000～16000g 离心 10 分钟。
12．立即吸取上清至预冷的样品管中，此即为抽提得到的细胞核蛋白。可进行后续实验或-70℃冻存。
对于组织样品：
把组织称重后，尽可能切成非常细小的碎片，按每 50mg 组织加入 200ul-500ul PBS，用匀浆器冰上匀浆制成细胞悬液，500 g 离心 2～3 分钟收集细胞，吸尽上清，收集沉淀。加入 200ul 浆蛋白抽提试剂后接上述步骤 5。

http://www.solarbio.com

楼主可不可以科普一下提取核蛋白在医疗方面的实际用途