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靶向阿昔洛韦

脸书谁会用

不能相信

我们前两个月的帖子早就讨论过说过这几年都没有你们怎么还在问呀？去看以前的讨论吧。不明白这东西跟脸书有什么关系？

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Nature子刊：CRISPR无可奈何的疱疹病毒，有望被这种最早的基因编辑工具攻克

1型和2型单纯疱疹病毒 （ HSV ） 是广泛且重要的人类病原体，感染后会导致口腔和生殖器溃疡，新生儿疱疹等，还会增加感染HIV的风险。
在皮肤或粘膜上初次感染后，HSV会在周围神经系统的感觉神经元和自主神经元中建立终生潜伏期。随后可从潜伏状态重新激活，进而引起皮肤和粘膜表面病变。
尽管目前的抗病毒疗法可以降低HSV急性感染的严重程度并减少病毒再激活频率，但它们并不能减少或消除潜伏病毒，因此HSV感染，常常复发，难以根治。
近日，美国弗雷德哈钦森癌症研究中心的 Keith R. Jerome 团队在 Nature 子刊 Nature Communications 杂志发表了题为： Gene editing and elimination of latent herpes simplex virus in vivo 的研究论文。
该研究表明，Cas9基因编辑无可奈何的潜伏HSV，可以被归巢核酸内切酶(Meganuclease) 有效清除，且通过不同血清型的多重AAV递送，能够大大提高体内编辑潜伏HSV的效果，为彻底治愈HSV感染带来新的希望和研究方向。
早在2016年，Keith R. Jerome 在 JCI Insight 杂志发表论文，通过AAV载体递送归巢核酸内切酶 (Meganuclease) 对小鼠的三叉感觉神经元内的潜伏HSV进行了体内基因编辑，但效率不高，不足4%。
归巢核酸内切酶 是具有较大识别位点 （12至40个碱基对的双链DNA序列） 特征的内脱氧核糖核酸酶，属于最早的基因编辑工具，但它在序列不完全匹配的情况下，仍可能发生编辑作用。
为提高体内编辑HSV基因组的效率，以达到治疗级别，研究团队尝试使用CRISPR/Cas9基因编辑系统代替归巢核酸内切酶，以及多种AAV血清型载体递送。
然而，出乎意料的是，实验结果表明，归巢核酸内切酶(Meganuclease)提供的基因编辑效率要比CRISPR/Cas9高得多。研究人员还尝试了双sgRNA，但并未能提高Cas9在体内编辑HSV基因组的效率。
研究团队猜测，可能是因为Cas9核酸酶太大，需要通过ssAAV载体进行递送，而归巢核酸内切酶(Meganuclease)更小，很容易装载到scAAV载体中，scAAV载体相比ssAAV可大大提高转导效率。此外，Cas9核酸酶的大小也限制了潜在启动子的选择。
因此，研究团队聚焦于提高归巢核酸内切酶(Meganuclease)效率，研究人员尝试了各种血清型的AAV载体。单细胞RNA测序表明，HSV和单个AAV血清型均非随机分布在神经节的神经元亚群中，这意味着改善向所有神经元亚群的传递可能会导致更彻底地消除HSV。
因此研究团队进一步使用不同AAV血清型组合，发现使用三重血清型组合递送归巢核酸内切酶(Meganuclease)，能够最大程度减少神经系统内潜伏的HSV基因组数量，AAV1+AAV8+AAV Rh10的三重组合最高减少92%的潜伏HSV病毒基因组。
总的来说，这项研究通过多重AAV递送归巢核酸内切酶 (Meganuclease) 成功清除了小鼠神经系统内潜伏的大多数HSV，如果进一步转化应用到人类，可能显著降低HSV激活，减少发病。这也表明了进一步优化归巢核酸内切酶 (Meganuclease) 递送，有望提供彻底治愈HSV感染的方法。
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疱疹病毒HSV血清型AAV内切酶基因
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研究人员正在为引起生殖器疱疹的单纯疱疹病毒2型寻求类似的治疗策略。他们预计至少需要3年时间才能进入临床试验阶段。
“这是一种治疗口腔和生殖器疱疹病毒感染的方法，”Aubert说。“我认为它将在不久的将来进入临床试验