产品特点
◎操作简便快速,可在20分钟内获得理想的DNA;
◎提取DNA纯度高,无抑制剂,A260/A280为1.7-1.9;
◎产率高,同样的样本量提取的DNA更多;
◎可用于各种口腔拭子、泌尿生殖道拭子及痰液样本中DNA的提取,提取后的DNA可用于核酸检测使用;
◎不含苯酚和氯仿等有毒溶剂,安全无毒。
产品介绍
BIOG DNA Swab Kit专门用于提取口腔拭子、泌尿生殖道拭子、痰液等的DNA的试剂盒。BIOG DNA Swab Kit采用了最新的优质进口离子膜,裂解液和洗脱液经过多次优化,能高效地分离DNA。提取得到的DNA较其它品牌的同类试剂盒产量更大,纯度更高,最大限度地去除了蛋白、色素、脂类等杂质污染,可以直接应用于PCR、荧光定量PCR和各种酶切试验等。
操作步骤
1. 请自行准备:无水乙醇、生理盐水、1.5mL离心管。
2. 取出析出液和洗涤液,按以下操作:
a) 析出液:4.5mL加入25.5mL无水乙醇,混匀;9mL加入51mL无水乙醇,混匀。
b) 洗涤液:9mL加入21mL无水乙醇,混匀;18mL加入42mL无水乙醇,混匀。
c) 配制好的析出液及洗涤液如出现沉淀,可在37℃溶解,摇匀后使用。
3. 样本处理:a) 拭子:向1.5mL离心管中加入800μL生理盐水,将拭子收集的样本置于生理盐水中,涮洗20秒,使细胞完全脱落,贴离心管壁挤干拭子上的液体,12,000 rpm 离心5 min,弃700 μL上清,剩余100μL上清,充分振荡混匀15秒。 b) 痰液:向收集的痰液中加入4倍体积1M NaOH,室温放置30分钟,每10分钟振荡混匀一次(如痰液仍粘稠,可适当延长液化时间),12,000 rpm离心5 min,弃上清,剩余100μL上清,充分振荡混匀15秒。
4. 加入200μL 裂解液和20μL 消化液,振荡混匀,56℃水浴10 分钟。
5. 加入500μL析出液,轻轻颠倒混匀,如有半透明悬浮物,不影响DNA的提取与后续实验。
6. 将吸附柱放入收集管内,将上述溶液转入吸附柱内,静置2 min,12,000 rpm 4℃离心1 min,弃收集管内废液。
7. 将吸附柱放回收集管内,加500μL 洗涤液至吸附柱内,静置2 min,12,000 rpm 4℃离心1 min,弃收集管内废液。
8. 将吸附柱放回收集管内,12,000 rpm 4℃离心2 min,离去残留的洗涤液。
9. 取出吸附柱,放入新的1.5 mL 离心管内,加入30-50 μL 洗脱液,静置3 min,12,000 rpm 4℃ 离心2 min,收集DNA溶液。提取的DNA即可用于下一步实验或-20℃保存。
注意事项:
1、 析出液、洗涤液含有刺激性化学物质,操作过程请做好防护措施,避免直接接触皮肤,防止吸入口鼻。如不慎沾染皮肤或眼睛,请立即用清水或生理盐水冲洗,必要时请就医。
2、 裂解液如有白色絮状物析出属正常现象,置于37℃水浴中溶解即可。