蛋白表达是一种利用原核表达系统、真核表达系统来进行外源基因表达的分子生物学技术,具体指的是用模式生物表达外源基因蛋白,常见的模式生物有细菌、酵母、动物细胞或者植物细胞等,那么蛋白表达常见的检测方法有哪些呢?今天小编在下面给大家做详细的解答。
蛋白表达原理是指基因在细胞内的转录和翻译过程,使蛋白质合成出来并在细胞中存在的现象,常见蛋白表达检测方法包括免疫印迹法、蛋白质芯片技术、质谱分析等。
一:免疫印迹法
此方法主要是采用蛋白电泳或同源蛋白质之间的相互作用,将目标蛋白质体系中的蛋白质分离到SDS聚丙烯酰胺凝胶上,再采用特异性抗体和蛋白结合,使用荧光素等物质发光检测其蛋白质含量及其变化,免疫印迹法具有较高的灵敏度和特异性,对于检测目标蛋白质具有优势,在临床应用中广泛应用。
二:蛋白质芯片技术
蛋白质芯片技术是一种同时检测大量蛋白表达水平的高通量技术,基本原理是将目标蛋白质附着芯片表面,然后用不同的特异抗体对芯片表面进行检测,最终得到目标蛋白的表达情况具有更高的通量、准确性和重复性。
三:质谱分析
质谱分析是一种通过测定蛋白质分子质量、序列、结构和功能等信息的方法,将目标蛋白质分离出来,将其分子中的粒子加速至一定能量,然后进入到质谱仪中进行分析,从而得到目标蛋白质的质谱图谱,判定其分子量、氨基酸序列和作用方式。
以上就是小编给大家介绍的蛋白表达原理和检测方法这块的相关知识哦,强耀生物专注于多肽合成、蛋白表达、抗体制备等,从事于多肽行业多年,产品品质一流,欢迎广大客户前来咨询。
蛋白表达原理是指基因在细胞内的转录和翻译过程,使蛋白质合成出来并在细胞中存在的现象,常见蛋白表达检测方法包括免疫印迹法、蛋白质芯片技术、质谱分析等。
一:免疫印迹法
此方法主要是采用蛋白电泳或同源蛋白质之间的相互作用,将目标蛋白质体系中的蛋白质分离到SDS聚丙烯酰胺凝胶上,再采用特异性抗体和蛋白结合,使用荧光素等物质发光检测其蛋白质含量及其变化,免疫印迹法具有较高的灵敏度和特异性,对于检测目标蛋白质具有优势,在临床应用中广泛应用。
二:蛋白质芯片技术
蛋白质芯片技术是一种同时检测大量蛋白表达水平的高通量技术,基本原理是将目标蛋白质附着芯片表面,然后用不同的特异抗体对芯片表面进行检测,最终得到目标蛋白的表达情况具有更高的通量、准确性和重复性。
三:质谱分析
质谱分析是一种通过测定蛋白质分子质量、序列、结构和功能等信息的方法,将目标蛋白质分离出来,将其分子中的粒子加速至一定能量,然后进入到质谱仪中进行分析,从而得到目标蛋白质的质谱图谱,判定其分子量、氨基酸序列和作用方式。
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