求大佬帮助我

AHAs酶，又叫乙酰乳酸合酶也叫乙酰羟基酸合酶，目前它的测定是加入底物丙酮酸37摄氏度反应30分钟后，产生的产物叫乙偶姻，加入硫酸终止反应，然后65摄氏度进行脱羧15分钟，再加肌酸萘酚65摄氏度15分钟，在这15分钟里产生有色物质，根据有色物质的量来算酶的比活性。
有色物质的量用乙偶姻标准品的浓度曲线对应的吸光度曲线来算，有色物质的量也就是乙偶姻的生成量。因为乙偶姻标准品在酶生成乙偶姻这一步后同步反应。
我的疑问就是，这个咋测量酶动力学km呢，这个酶活测定这么多步，又不是一步就能产生吸光度值变化的。。。。。。。文献里也一笔带过，不懂