今天做了wb实验，300mA恒流转膜，80V恒压电泳。之前制胶的时候胶制的好像还行，但是放冰箱过夜后就发现浓缩胶和分离胶的分界处有小气泡，想知道是否有影响。孵二抗时因为二抗不够，在配时可能膜有一条干了。而且跑的时候条带好像都偏下歪了，是什么原因呢？和蛋白定量有关系吗？求助各位大神。可以给点建议吗？