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酸枣仁皂苷含量检测

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酸枣仁皂苷主要来源于鼠李科植物酸枣的种子和果实,酸枣仁是一味中药材,皂苷是其中的主要活性物质成分,具有抗氧化等作用,被广泛的应用在不同领域中。对酸枣仁皂苷的提取,是需要采用溶剂萃取的。通过有机溶剂比如乙醇、乙酸乙酯等,使得皂苷从样品中分离出来,在进行过滤、浓缩、减压蒸馏等方式,得到相对纯化的酸枣仁皂苷物质。酸枣仁皂苷属于四环三萜类皂苷,其中包括酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B、酸枣仁皂苷E等十几种。

使用分光光度法可以测定样品中酸枣仁总皂苷的含量,也可以使用高效液相色谱-质谱联用(LC-MS)法测定具体单个皂苷的含量。对照品选择的是人参皂苷Rb1,用甲醇配置成1g/L溶液,备用。选择6个不同体积的标准品溶液,加入香草醛和硫酸,水浴加热15min,冷却后在最佳的检测波长处,检测对应的吸光度。以吸光度为横坐标,以浓度为纵坐标,制作标准曲线,回归方程及相关系数。取酸枣仁供试品的溶液,在最佳的波长处检测吸光度,可以多做几次重复,求取平均值。测定的吸收峰值,带入标准曲线的回归方程,可以获得样品的酸枣仁皂苷rb1浓度,根据酸枣仁rb1占总皂苷的比例,计算出样品中总皂苷的含量。

高效液相色谱法检测酸枣仁皂苷A,采用C18的色谱柱,以乙腈和水为流动相,梯度洗脱,使用蒸发光散射检测器检测。理论板数按酸枣仁皂苷A峰计算,应不低于2000。以酸枣仁皂苷A为标准品,精密称量,并以甲醇定容,制成0.1g/L的溶液。对于供试品,先粉碎,后过筛,在索氏提取器中,加入石油醚,加热回流4h,除掉石油醚和残渣,放在锥形瓶中,加入乙醇溶液,加热回流2h,过滤。残渣用乙醇溶解,并转移到5mL容量瓶中定容。分别吸取标准品溶液5uL,10uL,样品溶液10uL,注入高效液相色谱中测定,外标两点法测定计算。具体可以参考中国药典。


IP属地:上海1楼2024-05-16 10:26回复