第一步，SIRT1与α-MHC互作，降低α-MHC乳酸化水平
使用p300酰基转移酶激活剂干预未能完全挽救α-MHC K1897乳酸化以及α-MHC-Titin相互作用。为进一步阐明调控机制，确定α-MHC K1897相关的脱酰酶。Sirtuin家族蛋白是关键的脱酰酶，选择SIRT1–7作为脱乳酸化α-MHC的候选蛋白，发现只有SIRT1显著降低α-MHC乳酸化水平（图2a-b）。体内和体外Co-IP实验显示，SIRT1与α-MHC相互作用（图2c-d）。构建α-MHC不同截断体并进行Co-IP实验，发现α-MHC与SIRT1相互作用的结构域为mmCoA、MIT-CorA和TMPIT（图2e）。SIRT1的过表达降低α-MHC乳酸化（图2f-g）。同样，激活SIRT1会降低α-MHC乳酸化，而抑制SIRT1则相反（图2h-i）。类似地，Co-IP分析显示，过表达或激活SIRT1降低α-MHC K1897乳酸化，抑制SIRT1则相反（图2j-q）。
图2
第二步，SIRT1抑制α-MHC与Titin互作 Co-IP分析显示Ang II刺激减弱SIRT1与α-MHC的相互作用（图2r-s）。体外和体内Co-IP实验发现，激活SIRT1或Ang II处理，下调α-MHC K1897的乳酸化，降低α-MHC-Titin的相互作用；与Ang II刺激组相比，Ang II与SIRT1激活剂联合使用可减弱α-MHC K1897乳酸化，并降低α-MHC-Titin相互作用（图3a-b）。SIRT1抑制剂处理则结果相反（图3c-d）。 这些结果表明SIRT1是α-MHC K1897的脱乙酰酶。然而，SIRT1在心力衰竭中介导α-MHC K1897脱乙酰化并不是必需的。
图3
全文分享：【《Cell Res》解读：“乳酸化修饰”调控心力衰竭新机制】。
如有相关科研问题，欢迎留言探讨。
