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回复:【Richard//·Fantasy//】Daily Log@Toronto

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【7.15/16】
醒来已经是中午了
迷迷糊糊间听到他们在走廊大声说话和出门
大概他们出去玩耍了吧,周末突然就懒了,想宅在寝室了……
所以你大概从题目就注意到了,两天合在一起
7.15 起床正好遇到PKL过来做午饭
一起做了芹菜土豆炒肉丝 和 青椒炒蛋
很朴实但味道相当好,虽然一度担心芹菜能不能熟,不过事实证明担心是多余的,味道也调的相当好
下午准备做iLearn
PKL已经做好了biosafety那套quiz,我们就一起做chemical safety的quiz
真是难,我们俩一个人查课件一个人查google,结果还是不时出错
题目很综合,有的是考规章条文或者PPT上的拓展(简单),然而有的是考阅读理解那种,给个例子考我们对条文的理解(难死)
用了一个下午终于做完了
PKL的电脑在我们屋子连不上网(好像的确客厅信号很差),然而在他那屋信号也不好,经常卡掉
我最后因为错得有点多(每次确认选项都是我去拼一枪,结果就错掉了),就故意刷新从头做了一遍w
PKL那屋的都是清华的,似乎是很团结,一天到晚一起行动,包括一起买了自行车【虽然一周就丢了2台x
他们房间却很脏乱,垃圾都堆在墙角发酵,一股怪味,水槽里的碗碟也不收拾……简直梦魇……
晚上大厨舍友又疯狂虚区了
我帮着打了打下手,做土豆泥
主要的腌制和烤肉的部分都是他做的
相当西式很有感觉的 黑椒汁土豆泥香肠配牛排,外加比较出戏的番茄炒蛋和剩菜
加了黄油和牛奶的土豆泥香甜到不行,简直是完美
饭后依然是玩……又玩到凌晨
7.16 就更加荒废了
中午和PKL用剩的芹菜做了芹菜炒胡萝卜炒肉,味道依然不错
下午本来想看会论文的,但ipad一直连不上网,没法下论文,心烦意乱,只能又埋头游戏了……
晚上做的汤圆,然后煮了点面,配老干妈之类的辣酱随便吃掉了
大厨舍友回来还带了个西瓜,他说他朋友开车带他去美食节了,顺路买了个瓜
多伦多的确是,公共交通不那么方便,想去远处还是有车比较方便……
晚上又玩到深夜,直到不能不睡的时间才怀着愧疚感躺下了……
有人去summericious那个美食节了,有人去瀑布了,有人去城堡了……
想想自己宅掉的这个周末,感觉自惭形秽啊……
主要是回国的话工资是加元,不花掉会被赚汇率,而且不好带回国,所以得尽可能花掉_(:з)∠)_


IP属地:北京23楼2017-07-18 13:51
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    先解释一下断更的理由……
    这几天突然想玩星际了
    星际2国服连不上,下美服发现自动调到国服……
    干脆就下了星际1
    有个完美整合版,就是各种AI增强和MOD
    结果这么个20年前的游戏就这么让我着魔了好几天
    好了再玩剁手
    其次是被删帖删得心情爆炸……
    希望以后找个别老删我东西的地方
    毕竟我是不想留第二份记录的,删了就回不来了……
    以下正文——
    【7.14】
    从一早开始就充满了要到周末的感觉
    因为天气依然阴沉沉的,所以人又来的很少
    一到实验室先收了一波virgin,这波稳健,收到16只,直接达标了,没有白等ww
    Josh去TCP了,11点多才来
    先配了2块胶,把PCR过的样品上样跑了
    样品是名叫Nili的jerry带的summer student配的,感觉可能是个东南亚妹子,说话声音很甜(
    配胶时还出了点乌龙,有个人把中号的胶板放4℃了,还有个人跑完胶没收胶板(我后来才发现)
    和josh合计了一下,就先用大的胶板倒胶
    结果胶的体积还是按照中号加的,完全不够
    赶紧又去配了一份同样体积的,想趁着没凝固兑进去,结果拿回来胶已经凝固了……心态爆炸
    最后josh把胶板上凝固的胶扔了,我又配了一份,2份合在一起终于够了……
    ↑继上次搞毁stock之后,又一次证明论本科生做实验多么不靠谱……
    接下来Retrieve到了之前灭菌的LB Broth+Agar,倒了板子
    因为在60℃放久了,倒到最后agar都开始凝了……剩了3、4个板子的量倒不出来了= =
    josh还想办法要不要融化一下
    突然发现板子忘了加antibiotics……顿时心态再度爆炸,也不想融化了,直接丢了……
    完全不在状态……
    下午又收了一波virgin,收获颇丰,又有17只
    除去1只不小心被我弄断脖子挂掉的,32只分装了2只管子
    (他们管 管子 叫 vial,我一直以为时well ……
    各加了8只雄蝇,就等看他们愉快地产生XXX了
    比较神奇的是,雌蝇不fertilize也能产卵,只不过不会变成instar(fertilized egg则很快就变成了细小的一龄幼虫
    昨天coat的flask已经过去24消失了
    检查了一下,发现已经干掉了,废了……
    所以也就没有工作了
    今天又是大厨舍友下厨,他的好机油也要来
    准备了一大桌饭菜——
    水煮鱼、蚝油生菜、猪蹄汤……(还有啥 记不起来了
    机油带了一瓶白葡萄酒,8个人每人就分到一口 不过口感是真不错,印象深刻
    饭后他们就开始聊天
    因为我能听见他们放歌和聊天的声音
    不过我在摆弄星际
    11点多无所事事的时候,突然发现星际1下好了
    想随便试试,一不小心就玩到了凌晨3点……
    再不睡怕是要挂了就赶紧躺下了睡了


    IP属地:北京24楼2017-07-18 13:52
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      【7.17】
      早上基本上半死不活
      不过去早了依然没事干
      终于见到了Michelle,可以指导我们涂板子了
      不过涂板子得下午,因为菌要过夜
      上午本来想做个PCR,后来Jerry来了,josh和他合计一下,莫名其妙就不用做了……
      和josh吃了午饭,他带的周末家庭聚会剩的鸡腿和米饭
      我带的自制的蛋包饭
      其实就是蛋饼和饭,根本没包住……
      饭里有黄瓜、火腿、玉米粒,还加了番茄酱调味,感觉不错
      下午把隔了一个周末的杂交果蝇flip了一下,以免over crowd
      折腾了半天,瞻前顾后,结果还是忘了往壁上涂yeast……
      下午重新弄了个flask
      【然而走的时候又忘了补PBS,希望明天不要dry……
      等到快5点,Michelle才姗姗来迟
      streaking用的道具是只在教科书上见过的接种环
      让我怀疑是不是上世纪的遗留产物……
      而且真的是相当简陋的那样,在酒精灯上烧一烧,然后划线,再烧,再划线……
      这回为了防止菌的stock融化,直接用干冰了,很稳健,不过-20℃真的挺冻手的……
      样品好多,划线也用了好久,不过这次很快就进入状态了,对我来说重复劳动还是不成问题的,只要找到手感
      晚上大厨舍友没回来,PKL下厨,又是比较黑暗的一套料理
      豆瓣酱肉丁炒花生(花生我强行加的233)+烤猪排,然后整体加黑椒汁……
      按照PKL的说法,肉只要加调料吃起来都差不多,菜只要煮熟就差不多,以及麻油、酱油、蚝油什么菜都想往里招呼这种,果然是有黑暗料理的潜质……
      周四晚上Michelle突然在群里说有人把用过的瓶子和手套盒子丢在实验台下面
      他们就在群里推断是谁,首先就怀疑我们summer student
      老板知道了,还给我们又发了一遍实验室守则让我们注意
      说是守则,其实就是Michelle的一封抱怨邮件,说大家都不按照已经商量过的规矩办事,所以要强制执行
      的确维护实验室干净整洁是对的
      但总觉得随意就怀疑人很不合适,甚至有种Michelle是故意陷害我们的感觉
      不过今天来看,Michelle大概没有那么坏……


      IP属地:北京25楼2017-07-18 14:07
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        这一定是放置play…每天9点多到实验室,11点多才有事干…其实是诸多原因综合的吧,josh在tcp忙,我的果蝇杂交才刚开始,菌也才刚涂了板子…这几天因为菌要过夜,都要下午4点再开始做,其他时间简直闲得慌_(:з」∠)_


        IP属地:北京来自Android客户端26楼2017-07-18 23:01
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          【7.18】
          今天依然是慵懒的一天,从发帖时间就能看出来
          想到要收涂的板子所以紧赶慢赶去了实验室
          幸运的是,涂的板子长势良好,有不少单菌落,虽然菌落还是比较小
          也检查了一下果蝇,已经可以看到细小的幼虫了,nice
          给flask里加了PBS,虽然就加一枪PBS但还是要繁琐地收拾半天超净台
          听到带CZX的那个博后各种考问CZX……
          各种问关于实验操作和试剂的细节问题
          Josh来了之后博后还跟josh说,你得再教他一遍,CZX根本就没懂……
          真是心疼233
          【今天下午博后居然还给CZX科普物化和相对论,好像是因为他浓度算得不对,遭不住哈哈哈
          中午我们去检查了一下来这第一天染色的小鼠脑片
          第一次见识这里的显微镜室,炒鸡高端
          有好几台百万美元级别的confocal,zeiss的 leica的,一共4台的样子
          可以通过网上预约,最多可以4个人同时工作
          还可以选择用哪台仪器的,因为每台confocal支持的技术不一样
          josh预约的是带STED的仪器,据说说是很清晰,而且好像不用担心淬灭
          软件很复杂,折腾了很久,不过操作和我在北大用的zeiss的那台差不多
          用油镜还是第一次,感觉挺好玩的,镜油或许真的提高了不少分辨率
          然而,结果并不太好,只能看到DAPI和brdU的信号,神经细胞中的marker都没染上…… = =
          所以只试了一片就提前结束了
          午饭,你或许不敢相信,我是在医院吃的
          别看sickkids是家医院,其实里面有很多吃饭的地方,一层有一个角落有类似自助餐的地方
          食物种类很多,各种炒饭、蔬菜、鱼、肉、三明治、汉堡、沙拉、蛋糕、咖啡、茶、碳酸饮料等等
          选了个番茄烤鱼+咖喱蔬菜,配硬得一比的蔬菜,还是听好吃的……8刀,也算是差不多值这个价
          CZX选了个南瓜肉末咖喱,难吃得一比
          饭后也是很闲
          当作饭后娱乐地做了一波flipping
          距离上次做的flipping已经过了2周,该弄新的了,旧的瓶子里食物都被果蝇吃光了
          之后和josh聊了会天,聊了聊实验规划,反正没有细胞都是纸上谈兵
          josh还说,他是去年加的实验室,但现在想申pharmacy school,所以可能要和实验室break up了
          虽然他是UofT的,但pharmacy school和Department of Stem Cell还是有点区别的
          josh要申UofT的药学院还是要申请,并且是和其他applicants平等对待的(这点比北大生科保研凶险多了,甚至比CLS保研还要凶险……
          另外在waterloo还有药学院,不过那个还要其他先修课程,要求比较难达到……
          同是大三狗,都是挺麻烦的
          4点多去摇菌
          Michelle给我们show了一遍挑菌摇菌的技巧
          因为我们要做midi prep,需要50mL菌液,所以培养需要50mL以上
          但没有那么大的管子,只有50mL蓝盖管,而全加满就没氧气了
          所以只能弄2个copy,每个放30mL LB,而且要分2次挑同一个菌落……蜜汁操作
          做stock的还好,只需要用摇菌管,2mL
          这边的carb stock浓度比较低,稀释比是1:1000(我们用的1:10000
          清华那个SFM,也需要摇菌,我们俩就一起做了
          讲道理,这个人表现得挺冲的,有点让人不爽
          之前也合作过一次,刚开始说,菌有29管,一人一半吧
          他有6管,我这有还2个基因正好加起来8个管,就把这14个分给他了
          结果这货做了4个就直接全丢给我了
          这回也是各种让人心塞
          随便乱放我的管子,他自己的管子不让我碰
          我跟他说我的想法,他就一句,i don't understand
          习惯性地质疑别人说的话
          我在那绑摇菌管,以便放进摇床,但有管子立不住绑得有点费劲,这b就在一边嘲讽:还不如我一个人都做了
          刚开始有点手忙脚乱,盖子掉地上了,这b嗤之以鼻
          印象最深的是这b,在我只想确认一下 问他,“你管子里加的是30mL LB吗”的时候,他直接回了我一个鄙视的眼神,话都不说,我真想直接把管子甩他脸上
          不过想想workplace violence对双方都不好,技不如人被人跳脸也没办法,就认了
          尽管如此,还是建议要接触他的人提前做好心理准备,免得一下子上头
          这种人,总有人会收拾他
          晚上回来,PKL真的是做了一顿无米之炊
          强行凑了点洋葱和肉末做了个菜,还搞了个豆瓣酱鱼排,虽然鱼肉都碎了
          基本就靠老干妈下饭
          这个时候,我的花生米就发挥作用了w 各种受欢迎
          吃完洗了碗,出门买东西
          在Metro买了大量的菜、牛奶、零食和杂货,就像要把超市搬空一样
          因为今天UofT学生特价9折,PKL意外地获得了学生卡,所以就抱了他大腿
          【其实我们不能获得学生卡的,只有少部分去的早的人得到了卡,而且没被收回233
          打印收据的时候简直可怕,那么长一串
          打9折依然花了141刀……
          本来想用BMO的debit card的
          但上次大厨舍友划卡输PIN各种错误,我这次也复刻了这个错误
          【现在想想应该是密码前4位……
          最后还是只能用credit card
          回房间的时候,电梯在维修
          因为电梯在ground floor的时候,经常在外面按上行的按键没反应,即便在G层也不开门,很烦人
          回来的时候,想着手里提着那么重的东西,还要爬6楼,很绝望
          但电梯居然修好了,感动QAQ
          今天真的晚,做完实验已经7点多了
          吃完饭洗完碗9点多去买东西,回来10点了
          回来摸会鱼,就深夜了
          查summerlicious的信息,纠结了1个多小时也不知道选哪家,感觉有点不好办
          明天打电话问吧
          睡觉


          IP属地:北京27楼2017-07-19 13:44
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            【7.19】
            今天完全dedicated to experiments
            早上过去,指导实验的Michelle还没来,我们就先跟着Marian准备做stock的管子
            现在已经大概清楚了,Michelle就是小老板【虽然实验室人不多,但很杂,所以有个小老板也好
            而Marian就是给Michelle搬砖的,而Michelle的砖现在都落在了SFM头上,所以他第一周全用来genotyping了
            上午做的midi prep
            等Michelle来了之后实验就进入正轨
            首先是配平
            还好我们是一个菌液分了2管,这样配平就可以2个互相加了
            先放上一管,tare,然后放另一管,补差值的一半,再tare,放上另一管,检查是不是0
            这个方法有点好用啊,只不过差值是奇数会比较麻烦
            接下来就是使用让我想起AE86仪表盘的古老离心机
            调节全是靠拧的,而且仪表都不是数字的,而是指针的……
            这机器,加速时抖动得厉害,可能是固有频率,在1000转左右就像癫痫发作一样= =
            3000转的时候,旁边别的离心机的转子都在跟着震动……
            还有就是减速特别久,加速2分钟,减速5分钟,简直忍受不了……
            不过这玩意居然还能冷冻,不错
            集菌、重悬、裂解、中和、过柱子吸附、洗涤、洗脱、再沉淀、溶解
            反正提DNA大致就是这种步骤,mini、midi和maxi差别也只在体积上
            上午的时候SFM不知道时起床气还是什么的,嘴很臭,莫名其妙地垃圾话很多
            我帮他拧开管子,他说拧开干嘛,手欠?
            因为他说他做过大提质粒,所以不清楚的地方就问他,他倒好,要么爱答不理,要么直接回一句,废话
            差点跟他怼起来,不过后来还是想想算了,毕竟如果闹起来对彼此都不好
            不想因为自己的原因让别人也待不下去
            反正他只要他还肯动手做,我也就没啥可抱怨的,大不了我就认个怂服个软,行行行你说得对
            不过中午组会的时候就看他点头打瞌睡,下午可能是累了,也就不喷人了
            感觉下午效率比上午高得多,能合作做得就快了
            说真的,清华真是人才辈出,不仅出在微博被人围着骂的厄介**,也出这种不会为人处事的**
            中午组会Michelle讲paper,我已经看过一遍了,内容大概也了解了
            反正看起来也没啥内涵,就是一堆测序数据,背景倒是指的听听
            中途因为要收离心的菌,还跑出去一趟
            组会的午饭这回是凯撒沙拉配千层面
            千层面软塌塌的,不好吃
            凯撒沙拉也一般,整个屋子都是奶酪的臭味……
            弄完质粒已经4点了
            中途出去享受了一下每周福利,今天的免费茶和咖啡
            喝了杯refresh mint,感觉神清气爽
            下午后来SFM去忙immunestaining去了,反正最后步骤也简单,我就一个人干完,帮他把东西收拾了
            他5点走人的,而那个时候,我又为了明天的实验,在抓紧时间弄菌
            吸LB、加抗生素、挑菌接种,其实一个人弄也挺快的
            今天提了11个line+SFM的5个line,俩人已经心力交瘁了
            我还有一半的菌,也就是12个line……
            总之分成6+6分两天做完吧……
            之后jerry跟我讨论了一下课题
            主要是josh可能这段时间比较忙,他收集的果蝇脑足够了,要开始解剖和观察荧光了
            而我之后的细胞实验正好还需要jerry带,所以josh直接把我托付给jerry了
            于是jerry就跟我讲了讲我要做的事
            basically【他们特别喜欢讲这个词,就跟我们说“讲真”一样顺口
            就是有个基因会发生fusion,1个激酶FGFR和1个DNA binding protein TACC,融合蛋白可以结合纺锤体导致有丝分裂异常,产生非整倍体也就可能致癌
            这种原因引发的癌症占所有癌症中的3%
            在果蝇中转入融合蛋白的基因,可以诱导和人体内类似的肿瘤症状,可以说非常6了
            后来RNA seq发现一些离子通道的表达很高
            其中正好有一个是我要筛选的,钙诱导的钾离子通道
            所以我就要养细胞,然后用RNAi knockdown离子通道的RNA,如果观察到对正常细胞的增殖有些微影响,而对癌细胞增殖有巨大影响,那么实验就成功了
            同时CZX收到了带他的博后的任务
            原本他是在果蝇中做一个电压门控通道piezo
            正好Xi跟他说过可以把piezo和KCN合在一起考虑
            今天博后听jerry给我讲,然后突然一拍大腿,想到了
            就让CZX用和我一样的细胞体系,做piezo
            最后是同时敲低KCN和piezo,看表型,确认是不是在同一途径中
            jerry本来说是速战速决的,因为已经7点了
            然而因为博后的加入,他俩谈得情投意合,结果最后8点才完事
            反正这俩人可能已经讨论到要发paper得程度了233
            饿得很惨,好不容易拖着沉重的脚步回到寝室
            晚饭是炒粉丝,和猪肚汤
            猪肚已经被捞差不多了,还给我剩了2块猪肚和一些蘑菇渣,汤很浓很辣,随便喝了点
            炒河粉随便吃,根本吃不完,拌点老干妈就凑合吃了……
            晚上吃完饭,和CZX交代了一下课题
            我俩其实不是太明白实验思路,knockdown是正常思路,但2个临界剂量合到一起有什么意义呢?如果是为了验证两个通道在一条途径中,直接做效率最高的knockdown合在一起就好了……
            还吐槽了一下实验室的穷:
            这里各种仪器看起来都很有年头了……外壳发黄,仪表风格也很古老
            生锈的天平,斑驳的烘箱,都诉说着这个实验室有多么的潦倒
            什么仪器都没有,缺超净台,缺各种架子,都靠人的智慧,自己搭
            移液器也是几套很便宜的gilson,而且只有3个量程的移液器,没有排枪没有连续分液器……
            不过这边的实验室的确厉害,枪头都直接买灭好菌的,用完就丢
            手套也用得很快,2天一盒的样子……
            最厉害的是,这边的实验室,好像通风系统很高级,实验室内细菌很少,即使在bench做细菌试验,也不担心污染,真的是不敢想象……我们的苗房都会莫名其妙沾染蚜虫,而细菌这种无孔不入的东西居然都能防住……
            也许福利这么好条件这么好,实验室经费也很吃紧吧
            有两个实例让我印象深刻
            第一是,Michelle说大家清点库存时彻底一点,别没用完就订,weekly budget不够,买了你的抗体就买不了别人需要的东西了……
            另外就是,老板说,immunestaining的时候,如果抗体work,下次就把浓度减半用,反正不管浓度多少最后观察效果差不多,还能节省抗体
            CZX说老板之前跟他说,时间比金钱贵,如果要你自己配试剂而你发现有kit,那我们就订kit
            当时CZX觉得老板很帅,现在觉得怕是打肿脸充胖子……
            经费这么紧张,听起来也是好心酸,几家欢喜几家愁啊
            已经11点多,折腾Bell的电话账单折腾半天
            虽然试图用BMO的那张储蓄卡付款
            但钱扣了,不知道Bell那边什么时候到账……
            蛋疼……


            IP属地:北京28楼2017-07-20 14:28
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              笼罩在云雾中的天际线;virgin female;炒的芹菜土豆肉丝;大厨室友的猪排配土豆泥;炸花生米;蛋包饭;偶然从窗户落到窗边的椴树花序,带来了一缕窗外的清风,没想到苞片居然和翅果的翅有相似效果啊233
              现在在cn tower,上观景台需要排队等,无聊中…_(:з」∠)_










              IP属地:北京来自Android客户端29楼2017-07-21 08:05
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                【7.21】
                轻松了几天之后,今天终于要死了……
                早上依然是10点多去,意外地发现,上电梯的队伍都排出楼外了
                还在想,难道这就是上班高峰吗
                进去才知道,PGCRL这边code red了,换句话说就是哪里着火了,全楼疏散……
                这么刺激啊……
                上午依然划水,看着CZX做实验
                CZX说他们验证CRISPR的knockout效果,结果做了4次,没有一次一样的
                这回换更好的酶,用dNTP、buffer、引物,那种复杂的体系重新做了一遍
                summerlicious是多伦多这边著名的美食节
                从6月底到这周末,全城有100多家餐厅参与
                在这期间,可以在这些餐厅享受到特价的套餐
                套餐分为前菜、主菜和甜点
                午饭分3档18/28/38,晚饭也分3档28/38/48
                老实说来这里之后还没有在外面吃过特别像样的大餐,就决定一定要吃一顿
                因为之前也查过,summerlicious预定都是要2人起,所以就强行拉上CZX了
                附近就有一家店感觉不错,不过一直没法在网上预约,今天就打电话预约了6点半
                查了查Reds Tavern的菜谱
                google还是很稳健的,查菜名会有图,而百度则可以提供中文名,更好理解
                之后CZX下去做dissection
                我没幼虫可解剖,就直接那pupa玩了
                第一个拿了个空的蛹,第二个拿了个快孵化的,头部和胸已经变成了成体果蝇的样子,而腹部还是幼虫的样子
                也没什么意思……
                等CZX用PFA固定脑子的时候,我下楼买了个bagel
                bagel club超好吃,鸡胸和火鸡肉特别香
                下午又浪了一会,后来跟Michelle来了,谈了谈midi prep的问题
                Michelle说要我周二之前提完所有质粒,主要是昨天提的一波11个只有1个浓度足够,感觉压力很大
                Jerry回来,给我和CZX培训了一下细胞传代和冻存
                Jerry做实验就比较粗放,但仍然很注意消毒
                这次实验用的肿瘤细胞比Nerve Stem Cell好养,长得快,而且flask不用coat就能贴壁
                细胞传代就是胰酶消化,离心,取一部分加入新的flask,剩下的一部分用来冻存
                在倒置显微镜底下第一次看到fully confluent的细胞,感觉有点奇妙
                之后就是抓紧吃饭前的时间,提质粒到洗脱,就丢在一边等着洗脱下来了
                晚饭的店的名字叫 Reds Midtown Tavern
                其实之前走过那个路口就注意到这家店了,从外面看还挺有风味的
                今天进去,果然也不一般
                内部很有氛围,装饰简洁古朴,还有个吧台
                菜品还是很欧洲风格的,毕竟分类是属于continental
                菜单可以看下面,点评再开一层吧

                我选的是yorkies→pork→creme brulee
                此外还点了白葡萄酒
                这家店的分量不少,但又不乏精致,味道也相当好,可以推荐
                顺带一提日文中居然有クレームブリュレ这个词……外来语可怕……
                晚上CZX回去挑菌摇菌(就是昨天的克隆
                我则继续做midi prep,在间歇把明天的菌摇了
                结果今天的结果也不太理想,虽然又1管浓度多达480ng/μL,而且看起A260、A280数值都是对的
                但是还有2管fail了,在50ng左右……
                如果按照3/5这种成功率的话,很难按计划完成任务啊……
                可能先争取把4个基因都覆盖到,再增加每个基因的RNAi个数,回比较实际吧……
                另外今天好像弄坏了个electronic pipette,进水了,虽然还工作,但可能堵住哪里了,没法吹吸
                自首了,可能Michelle不会让我赔全款吧,查了一下报价400刀,其实还是赔的起的(x
                心情一直比较低落,不过有3管浓度达标还稍微有点安慰……
                可能midi prep的确有限制吧……SFM的样品也都在50ng左右
                晚上8点多回去,Xin已经在收尾了,之后很快实验室就空无一人了
                虽然实验室一直人都不多,但留到这么晚只剩一人的情况还是头一次
                他们这边的老外都很relax,上午过来随便水水吃午饭,下午3点多收拾收拾,4点就又走人了
                午饭时间还要喝杯咖啡之类的
                一天的工作时间也就那么3个小时,做个PCR跑胶就结束了……
                周末也不上班
                搬砖很拼的都是亚洲人……
                15楼没有人,灯自动都关了,而我走进去,2排实验台的灯自动打开了
                一个人走夜路回去,感觉比平时傍晚回去的时候孤独多了……


                IP属地:北京31楼2017-07-22 14:02
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                  CN Tower 合集









                  IP属地:北京来自Android客户端32楼2017-07-23 08:05
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                    美食特辑







                    IP属地:北京来自Android客户端33楼2017-07-23 08:07
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                      Casa Loma 特辑











                      IP属地:北京来自Android客户端34楼2017-07-23 08:11
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                        历史中的sickkids,以及看到老李(李恩菲尔德)本体啦w



                        IP属地:北京来自Android客户端35楼2017-07-23 08:12
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                          【7.22】
                          今天真的是相当不幸的一天,下午的实验毁了全天心情
                          早上10点起来,随便吃了点早饭
                          弄了块面包,加奶酪和香肠
                          FCZ好像不太适应奶酪的臭味,一连作呕,而且问我有没有问到什么臭味……
                          吃完饭就整装出门了
                          Casa Loma离我们住的地方不远,走路半小时左右,沿着spdina一直向北,不一会就能在树冠的间隙种看到城堡的尖塔
                          地铁也很方便,1号线在Dupont下车往北过铁路桥桥即到
                          路边都是私人小院,很别致
                          天阴沉沉的,甚至还开始飘小雨点了
                          城堡外先爬了一段楼梯,以为是进入城堡了,结果发现只是个街心公园,叫spdina park,还有对建立spadina estate的祖孙几代的记录
                          将近11点到了城堡前,买票要排一小段队,但这个队伍在我排进去的时候,就已经变得很长了
                          果然还是要早来
                          刷debit/credit card可以在门外买,比在里面用cash买方便
                          门票24刀,换算成RMB比故宫还贵(x
                          进去之后是一层大厅,富丽堂皇,天花板上垂下几面国旗,墙边有雕饰精美的柜子衬托墙上城堡主人的挂画
                          悬挂在门上方的银色骑士盔甲很有气势
                          右转有个神秘入口到地下一层
                          地下一层包括纪念品商店和电影院,还有比较有趣的tunnel
                          tunnel通向城堡西北方向,又长又狭小,而且带着地下独特的湿冷气息
                          不仅如此,这边配合着这种压抑的氛围,特地在墙上展示了 the dark side of Toronto
                          包括了上世纪初1900s~1930s多伦多比较惨的一段历史
                          先是Great Fire of Toronto,烧得一片疮痍
                          接着plague,牲畜患病,人也患病,还看到了100年前得hospital for sick children,历史真久远啊
                          之后又经历了prohibition,好像影响了诸多行业——酿酒业、矿业等等,造成大量失业和贫困问题
                          所以接踵而至的就是depression……
                          真的是比较黑暗的一段历史
                          道中看到有个furnace的复原,就这么一个小小的炉子,一年冬天要烧掉800吨煤,花掉十多万刀……
                          上到地面上,是车棚和马厩
                          【stable马厩 这个词以前还看到有人机翻成“稳定的” 233
                          马厩已经没有马了,但还装模作样地堆了干草
                          墙上又金属牌,写着马的名字——prince、the widow、matchless等等,Sir Pellatte最钟爱的马居然是widow,名字不太吉利……
                          旁边还有个车库,有不少老爷车,也感觉不出来那时候汽车的区别
                          居然还有个类似现在三轮蹦蹦那种感觉的车,当时怕是也只有豪门才能拥有w
                          与马厩相连的是一个温室,和花园
                          观赏植物和国内的差不太多……
                          一层有会客厅、吸烟室、撞球室、餐厅、书房等等,是进行各种社交活动的地方
                          吸烟室和撞球室那里尤其是写了,for gentleman 233
                          从一层大厅出去,是一个平台,俯瞰下面的花园,远远地可以看到城市天际线,很棒
                          书房和餐厅在一起,空间十分宽敞,而且因为有落地窗,也很亮堂
                          在旁边还有一间小的备餐室,也是够齐全的
                          走廊尽头是conservatory,应该是玻璃温室,但看起来很多人在里面做礼拜……
                          二层主要是住宿的地方
                          Sir Pellatte 好像很有野心,希望有朝一日能接见英国皇室
                          所以有个windsor room,建得十分漂亮,楼下有个给女王预留的椅子,也很逗w
                          Sir Pellatte的房间厚重豪华,深色系的家具,地上有块老虎皮
                          厕所居然也展出了,特别宽敞,有抽水马桶(!),有个浴缸还有淋浴
                          还看到了Sir Pellatte的正装与便服
                          从卧室出门有个阳台,就能俯瞰一层大厅
                          Pellatte夫人的房间就在隔壁,浅色系,很柔和
                          卧室意外地简洁,没有那么华美的装饰
                          有个朝南的阳台,可以吹吹风
                          厕所一样宽敞,不过注意到了没有淋浴w
                          Pellatte夫人的衣服和化妆品挺多
                          尤其还有两件她在上学时的衣服
                          Pellatte夫妇房间对面是客房,亚洲风格
                          红木家具,孔雀屏风,还有日本舞女的小雕像
                          待遇相当不错
                          即便是仆人,也待遇不错
                          未婚的女仆住的是跃层,2人一个小房间
                          虽然的确朴素了点,但比我woodsworth的房间可能还好一点……
                          有床,有桌子,还有个小沙发
                          一周工作6天,周日礼拜放假
                          三层就是各种展出,包括二战、军队建设、Pellatte董事会的贡献等等
                          比较有趣的是有个楼梯可以上塔
                          但要排挺久的队,因为楼梯狭窄陡峭,只能容纳一个人通行,有工作人员维持秩序
                          从塔上可以俯瞰整个城堡,也可以远远地看附近的小房子和绿意盎然的树林
                          【下塔的时候,等着上塔的队伍已经排了几十米出去了,目测他们得等一个小时……
                          城堡前前后后转了1个半小时就出来了,的确是比较走马观花
                          如果仔细读各种介绍说明,可能能玩上3个小时
                          房间的风格 比较统一,但看多了就有点审美疲劳……
                          从城堡出来,坐地铁到了college那边
                          出来正好是yonge street,路边很多小饭馆
                          随意选了家,比较奇怪的syria餐厅,有种绿绿特有的感觉
                          有个大胡子叔叔在后厨忙活,给我点菜的虽然看起来像个本地人,但估也是syrian,说英语有口音
                          这边是卖syria特有的酱料的炒饭或者卷饼,配蔬菜沙拉,套餐10刀
                          要了一份虾卷饼,蔬菜可以选番茄、生菜、紫甘蓝和甜菜根
                          酱汁是左右各加一种,一种酱是类似蛋白酱,很浓很香甜,另一种是辣酱,也不错
                          沙拉则是拌好的,感觉就像是外面买的现成的沙拉配方,加了点他们自制的酸甜汁,和胡椒之类的
                          随便吃一吃还是可以的,还是建议吃炒饭不要卷饼……
                          另外店里好像只有我是个东亚面孔,有点方
                          吃完之后,雨下大了
                          路上正好看到Bell的店家,就进去问他手机账单的事
                          店员说没法在店里付,而且也没法帮我解决,只能把客服电话给我,帮我接通人工服务……
                          电话那边声音不太清楚,主要听力也不行,说快了什么都听不懂……
                          总而言之人家找我要各种身份信息,我因为在外面又提供不了,最后只能说I'll call later
                          去实验室,开始提质粒
                          总之是各种不顺,电动移液器的管子用光(问Xin,Xin也不知道,最后我瞎翻找到了),酒精的容器打不开(盖子好像要按一下才能打开,但有个容器坏掉了,我让别人帮我开也打不开……),离心用错转速……
                          最决定性的错误是,我好像把Buffer PEL当成了Buffer PEQ来用了
                          那个silicon column,可能因为我错用了PEL,所以死活流不下液体,正常来说应该是能滴下来的
                          最后等了半个小时,都没见一滴流下来,就干脆去用个低转速离心好了
                          离心之后居然好使了,加buffer也能流下来了
                          但……估计是离心的那步,DNA没挂到柱子上,所以洗脱之后测了测浓度,果然很低,于是只能放弃了
                          这一下午都在和bug战斗,真心蛋疼……到最后又回归起点,还浪费了好多试剂,感觉特别绝望……
                          明天再提一波,然后估计试剂不够了,还要和Michelle再订
                          我和SFM提了50 prep的midi,我一共才4管能用的,SFM估计也不多……
                          Michelle怕是想砍我们(x
                          晚上回去他们都吃完饭了
                          大厨室友做了简单的饭,但很好吃
                          浓浓的微辣的猪蹄汤、土豆泥配番茄酱和洋葱和肉末、白菜叶卷肉馅
                          大厨室友说,老外最喜欢用烤箱,这边烤箱做东西简单又好吃,而且不用开火,好收拾
                          今天的晚饭的确贯彻了这一点……
                          吃完饭划水,又在房间里打了会地下艺
                          地下艺比wota好的地方在于,比较省地,我带的2根棒子现在还没用过,因为施展不开,但徒手就很方便
                          地下艺活动活动身体还是可以的
                          虽然这段时间日均1w步,但感觉站着坐着做实验的时间多,回来之后又很累不想动,可能还是不太健康……
                          总之晚安啦w


                          IP属地:北京36楼2017-07-23 13:24
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                            补一波casa loma











                            IP属地:北京来自Android客户端37楼2017-07-24 09:40
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                              pellatte太太原味水手服 &远远看到城堡尖顶



                              IP属地:北京来自Android客户端38楼2017-07-24 09:41
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