-
-
0PCR(Polymerase Chain Reaction,聚合酶链式反应)是一种分子生物学技术,用于在生物体外快速、大量地复制特定的DNA片段。尽管PCR实验的原理和操作流程看似简单,但实际操作中却存在许多潜在的问题。以下是一些常见的PCR实验问题及相应的解决方案。 01拖尾、弥散现象 • 可能原因:体系配置偏差(如酶用量、dNTP、镁离子浓度过高)、扩增循环数过多、PCR体系中存在污染、电泳缓冲液不净、电压不稳定、退火时间不当、模板不纯等。 • 解决方案:减少
-
0癌症转移是指癌细胞从原发肿瘤部位脱离,通过血液或淋巴系统传播到身体其他部位,并在这些新位置形成新的肿瘤的过程。这一过程是导致多数癌症相关死亡的主要原因。转移过程通常包括以下几个步骤:局部侵袭、血管内渗(进入血液循环)、生存于循环中、血管外渗(离开血液循环进入目标组织)以及在新位置的生长和增殖。 尽管已知某些脂质相关的变化对于癌细胞的外渗至关重要,但关于具体哪些脂质成分支持癌细胞在新环境下的存活与生
-
0杂菌污染是实验过程中屡见不鲜的难题。在进行平板划线接种时,一旦察觉细菌受到杂菌的侵扰,我建议尽快重新培育新的细菌样本,以免后续实验衍生出更多误差。 关于如何有效防止杂菌污染的再次发生,以下是我提出的几点提议: 1、 定时更新培养基,并验证抗生素的有效性: 长时间使用的培养基可能会导致细菌生长状况欠佳或遭受杂菌污染。因此,我们需要定时更换新的培养基来降低这种风险。同时,验证抗生素是否仍然有效也至关重要,抗
-
0HE染色适用于生物医学、病理学科研与教学。在病理诊断领域,HE染色凭借其卓越的染色效果,成为了广泛采用的常规染色方法。它不仅能够让组织在显微镜下清晰显现,更有助于病理医生做出精确的诊断。今天给大家梳理了HE染色中常见的问题、处理策略以及实验中的关键注意事项。 一、染色不均问题 染色不均往往由切片厚度不一、染色时间不当、脱蜡水化不充分或试剂分布不均等因素引起。解决方法如下: 1、提高切片技术,确保切片厚度均匀,
-
0
-
0在基础科学研究中,生物样本的前处理环节举足轻重。它不仅对实验结果的精准度和可信度产生直接影响,还能大幅提升数据分析的效率与品质。通过标准化的前处理步骤,我们能最大限度地降低样本污染和变异的风险,确保所获取数据的有效性。今日,让我们一同探讨学习常见的样本前处理方法! 一、样本采集 Ⅰ 细胞样本 对于贴壁细胞,需利用胰蛋白酶或细胞刮刀处理后转移至离心管;悬浮细胞则直接吸取至EP管。随后,在4℃条件下,以1000×g的
-
0一、细胞 1.细胞接种浓度的选择 • 贴壁细胞:鉴于细胞尺寸的差异,建议依据实际情况适当调整细胞密度分布。 • 悬浮细胞:通常在96孔板中,每孔置入10000个细胞,可通过细胞计数方式进行布板。 采用状态优良的细胞进行铺板,传代过多的细胞不宜使用。铺板过稀,细胞杀伤效果不明显;铺板过密,细胞可能大量死亡。细胞密度多采用10000个/孔,100ul/孔。 2.药物浓度与处理时长的设定 • 不同细胞对药物的敏感性不同。若药物浓度未知,可查阅相
-
0动物的选择大鼠和小鼠。 造模方法 目前常用的肥胖动物模型主要分为四大类:食物诱导型、下丘脑损伤型、内分泌失调型和遗传型。 01食物诱导型肥胖动物模型 采用高脂饲料结合改良的方法12周成功建立饮食诱导型肥胖动物模型,致肥率高达83.3%,造模结束后观察模型组的体质量、Lee’s指数、血清TG值等指标与正常组存在显著性差异,且肾脏病理表现符合肥胖相关性肾病(ORG)早期病理表现,除了作为研究单纯性肥胖的动物模型外,也可作为实验研
-
0一、膜过滤的基本机理 微孔滤膜的工作机制依托于膜过滤原理,即当液体或气体在压差驱动下穿透半透膜时,滤膜会拦截直径超出其孔隙的颗粒或分子,形成滤饼或吸附层,而直径小于滤膜孔隙的颗粒或分子则穿透滤膜,达到分离效果。 膜过滤的过滤机理主要分为三种:机械拦截、吸附拦截和架桥拦截。 机械拦截:这是最直接的过滤方式,颗粒物因大于滤膜孔隙而被拦截。 吸附拦截:这是颗粒物与滤膜表面相互作用而被截留的现象,即便颗粒物尺
-
0青少年近视已经成为日益严重的健康问题,了解近视的发病机制、影响因素等已尤为重要。用实验动物研究近视的发病机制是近视研究的必由之路,近视动物模型的建立为研究人类近视提供了极有价值的信息和思路。近年来,学者们采用鸡、兔、恒河猴、小鼠、豚鼠等动物建立了多种模型,研究了形觉、色觉、光觉等对眼球正视化的影响及与近视的关系,并深入研究了相关细胞因子及眼内神经递质的变化等。豚鼠在近视研究方面具有明显的优点,目前
-
0痛风性肾病(gouty nephropathy,GN)亦称尿酸性肾病,是原发性痛风或高尿酸血症患者病情迁延发展,累及肾脏导致肾脏损伤的一种疾病,若未进行及时有效救治,最终可发展为慢性肾功能衰竭。 实验动物 SD大鼠、小鼠。 造模方法01造模方法(一) 高酵母饲料的制备 按照酵母提取粉:普通SD大鼠饲料粉=1:9的比例充分混合搅拌均匀(酵母提取粉含量控制为10%),加工制成颗粒状混合饲料。 连续21d后眼眶静脉丛取血测SUA、SCr、BUN均较空白组升高,造模成功
-
1
-
0创伤后应激障碍(post-traumatic stress disorder,PTSD)是指个体暴露于严重心理创伤后产生的一种应激相关障碍,会使得个体变得脆弱,甚至严重影响患者的社会功能和生活质量。PTSD的诊断首次出现于 1980年《美国精神障碍诊断分类手册-第 3 版》( DSM-3) 中,2013 年修订的DSM-5中,PTSD被单独列为“创伤和压力相关的疾病”,提出 PTSD 的 4 种典型行为特征:①重新体验:患者反复、不自主、侵入性痛苦地回忆起创伤事件,主要表现为噩梦和记忆回闪;②回避:
-
0本来是打算造肺炎模型,造了两次后效果不好,使用结晶紫滴鼻,发现大部分的结晶紫只染紫了鼻道前部分,和整个口腔,没有染紫气管,究竟怎么样才能避免药液进入口腔,进入气管呢?
-
001从经典遗传学到表观遗传学 经典遗传学认为遗传是由 DNA 序列决定的,父母将他们的基因直接传递给子女。然而,即使在所谓的同卵双胞胎中 — 携带相同的等位基因,一些遗传性状在表现上也有差异,这正是表观遗传学领域所要解答的问题。 “表观遗传学”这一术语在 20 世纪 40 年代就由 Conrad Waddington 提出[1],表观遗传学认为即使基因序列不变,通过改变染色质的结构与活性可以改变基因的表达与功能,并最终产生“可遗传”的个体表型的改变。
-
0雪貂的头静脉和隐静脉可以采血嘛,怎么操作呀
-
0经过长时间的摸索与实践,Western Blot实验的过程虽曲折,但实则掌握其要领后并不复杂。我归纳了在进行WB实验时可能遭遇的难题,并剖析了潜在的诱因及相应的应对策略,期望能为你的实验成功奠定坚实基础。 常见问题及其应对策略:问题一 转膜效果欠佳 1. 膜浸润不均 • 采用纯甲醇充分浸润膜材料。 2. 目标蛋白分子量偏小(<10kDa) • 选用小孔径膜,并缩减转膜时长。 3. 目标蛋白等电点与转移缓冲液pH值相近或一致 • 尝试替换为其他缓冲体系
-
0在做WB实验时,各位是否清楚如何挑选合适的PVDF薄膜?是否熟悉活化处理流程?转膜后又该如何妥善保存?这些操作技巧,各位是否都已熟练掌握? 一、薄膜选择 在WB实验中,选择恰当的薄膜是至关重要的一环。不同类型的薄膜各具特色,因此需根据实验的具体需求来选定。对于分子量小于20kDa的蛋白质,推荐使用小孔径薄膜(例如0.22μm),以确保更佳的转移成效。而针对多数常规蛋白质实验,采用0.45μm孔径的薄膜通常能满足要求,带来出色的性能
-
0自主荧光,指的是在组织或细胞样本进行荧光检测时,所产生的与目标信号无关的背景荧光信号。 解决自主荧光问题主要有两种途径:一是选用冰冻切片进行染色,二是减弱石蜡切片染色中的自主荧光。 本文将重点探讨:如何降低免疫荧光染色实验中石蜡切片的自主荧光。 一、石蜡切片的特性 01 石蜡切片厚度可达3微米,实验过程中组织损耗较小 在利用普通小鼠、基因敲除小鼠等小型动物进行实验时,我们经常需对同一组织进行病理学及分子生物学
-
0在进行病理分析时,切片染色无疑是至关重要的一环。尽管大家都曾尝试过,但成果却千差万别。为何别人做出来的切片染色那么好看,而自己总是做不好? 今天小编给大家分享一些切片染色的独门绝技。 石蜡切片技巧 1. 样本取材 • 迅速行动,避免组织细胞成分与结构的改变。 • 轻柔操作,最大限度减少样本损伤。 2. 样本固定 • 固定液需即配即用,以防氧化还原反应导致失效。配置后置于阴凉避光处保存。 • 确保固定液充足(通常为样本体积
-
0
-
0消毒与灭菌的方法,大体上可以分为四大类别: 1. 热力消毒:涵盖直接火焰消毒、干热消毒、高压蒸汽消毒、分段消毒以及沸水消毒; 2. 过滤除菌; 3. 辐射消毒与灭菌; 4. 化学消毒剂消毒与灭菌。 本实验将介绍培养液与玻璃器具消毒中部分常用的消毒方法。 1. 干热消毒法(热空气消毒) 干热消毒通常利用电热烘箱作为消毒设备。将预先包装好的玻璃器具,例如带有棉塞的锥形瓶、试管、封装好的吸管、培养皿等,置于电热烘箱内。 开启烘箱顶部
-
0
-
0(1)普通动物(Conventional Animals,CV) 亦称一级动物,在微生物学控制上要求最低的动物,它要求不携带人畜共患病和动物烈性传染病的病原,一般是在开放(普通)环境下饲养。因价格低,故教学实验中常用之。 (2)清洁动物(Clean Animals,CL) 亦称二级动物,除普通动物应排除的病原外,不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原,需要在温度、湿度可控的屏障系统中惊醒饲养、繁殖或使用。 (3)无特殊病原体动物(Specific Pathogen Free Animals,SPF) 亦称三级动
-
0基因,作为生物体遗传信息的核心载体,通过基因检测,我们能够洞察身体潜在的疾病风险,并及早采取预防措施或进行干预。基因,这一遗传的基本单位,是生成一条多肽链或功能性RNA所不可或缺的DNA片段,可简单理解为DNA长链中的特殊段落。 而基因研究的首要步骤便是核酸的获取。核酸提取,往往是生物学研究的起点,其质量的高低直接关乎下游实验的成败。无论是克隆、PCR、QPCR,还是建库测序等,都离不开核酸的支撑。今日,我们就来一同探
-
0
-
0
-
0
-
0
-
0
-
01. 为何要及时固定样本? 采用物理或化学手段对样本进行固定,目的是尽可能保留其接近活体状态的结构特征,确保细胞内部的各种组分不被自身的酶分解而自溶,同时防止外界微生物的侵入和繁殖对细胞超微结构造成破坏。 电镜固定液中常用的戊二醛,对于糖原、核蛋白、微管、内质网等膜系统以及细胞基质,均展现出了良好的固定效果。 2. 冷冻后的样本是否适用于电镜观察? 冷冻处理后的样本不再适合进行电镜观察,因为冷冻过程中形成的冰
-
0流式细胞术(flow cytometry,FCM)是一种可在细胞或分子水平,对单细胞和亚细胞结构进行快速检测、分析或分选的多功能生物技术。由于其具有可对大量细胞进行高通量检测、可对单个细胞进行多参数分析,和能够同时进行细胞分析和细胞分选等优势,FCM在生物医学基础研究和临床研究中得到了广泛应用。 FCM在20世纪50年代被首次提出,并在此后得到快速发展和广泛应用,这得益于生物样品液流技术、细胞分选计数技术以及计算机数据采集与信号分析
-
0
-
0
-
0
-
000动脉粥样硬化模型:实验鼠自由进食及饮水,高胆固醇饲料饲养14周,监测每周体重及进食量变化。在8周和12周时取少量血清检测TC、TG,待14周取血清检测TC、TG,并取整条主动脉和主动脉瓣(心脏)进行染色检测。许多因素可诱发高脂血症及动脉粥样硬化症。为了促进病变的形成,在高脂饲料中还可加入甲基硫氧嘧啶、丙基硫氧嘧啶、甲亢平、维生素D、蔗糖等。例如使动物脑部缺血、电刺激中枢神经系统、高度应激状态、鸟类应用大剂量雌激素和暴露于000跪求会的大佬指点,最好描述的详细点,或者有学习的视频啥的看看00001 透射电镜概述 1、基本原理 透射电镜的成像机制涉及电子枪发射的高速电子束,该束流经由1~2级聚光镜聚焦后,均匀投射至样品待观测的微小区域。电子与样品间发生碰撞及非碰撞作用,鉴于电子穿透力有限,样品需极薄以确保电子穿透。穿透样品的电子,其强度分布直接反映样品区域的形态、组织及结构特征。这些电子随后通过物镜、中间镜及投影镜三级磁透镜系统放大,并投射至荧光屏上。荧光屏将电子强度转换为可见光强分布,从而呈现出与00PCR(Polymerase Chain Reaction,聚合酶链式反应)是一种分子生物学技术,用于在生物体外快速、大量地复制特定的DNA片段。尽管PCR实验的原理和操作流程看似简单,但实际操作中却存在许多潜在的问题。以下是一些常见的PCR实验问题及相应的解决方案。 01拖尾、弥散现象 • 可能原因:体系配置偏差(如酶用量、dNTP、镁离子浓度过高)、扩增循环数过多、PCR体系中存在污染、电泳缓冲液不净、电压不稳定、退火时间不当、模板不纯等。 • 解决方案:减少03没有麻醉深度的监测设备,实验时该靠什么来掌握麻醉的深度呢?麻醉深度不仅影响动物的镇静状态,麻醉效果和围麻醉期的管理以及麻醉药物的药理作用都会对实验动物的生理状态以及实验结果产生深远的影响。 本文将介绍一类麻醉常用药物戊巴比妥钠(Sodium pentobarbital),戊巴比妥钠属于巴比妥类麻醉药,在《麻醉药物和精神药物目录》中属于第二类精神药物。 优缺点 使用方便,可以腹腔注射(但其pH值高,腹腔注射可引起疼痛)或静脉注射;