回复：免疫组化，免疫荧光 咨询帖~~我提供咨询

PBS+Tween就是传说中的PBST（pH 8.0）

没有意思，活跃一下气氛

谢谢回复！！
我现在制作的细胞爬片，做的是跨膜蛋白的免疫组化，有病理老师叫我用95%乙醇固定5min，然后就直接放置在4摄氏度的冰箱里干燥保存，也有老师叫我用4%多聚甲醛固定20至30分钟后，然后放置在PBS中，放置在4摄氏度保存，我不了解这两种保存方法的区别，我该选用哪种方法合适呢？另外，放置在4摄氏度的冰箱里时我到底需不需要放置在PBS里呢？我的标本一般要放置2到3天才来得及做
期待您的答复

95%乙醇+5%的冰醋酸固定5min
跨膜蛋白还是比较需要温和一点的 固定液
然后。。
可以放PBS中 过一遍，然后 直接4度 保存，放冰箱时 不需要放PBS里，很有可能泡PBS时间长了 大部分细胞都跑PBS里面去了。

回复：19楼
我的问题好多天没人回复，就忘了。今天又转进来。
所谓ELISA的一抗就是它的包被抗体吧。我看有的教材上讲双抗体夹心法时，二抗是以一抗为抗原的。
   另外，我做免疫组化时，阴性对照背景着一层淡淡的颜色，
（一抗1：50，二抗1：400，）说明书上的一二抗均建议1：200.
再就是：样本边缘老是卷，
有什么建议给我？
谢谢！
   

你做免疫组化 1抗2抗 浓度有试过 说明书建议的浓度么。
样本边缘卷 ？ 切片时候没搞好是吧？
如果是石蜡切片 漂片时 把它摊平整 再贴片。。
冷冻切片 就是要选好 包埋剂 热电的不错。

我做的组织切片的免疫组化分析 DAB染色 然后用IPP6来分析的。 分析时用哪些指标比较好呢？我采用object%和阳性染色的平均光密度，各处理之间object%差异显著，后者却没有显著差异，这个怎么解释啊？阳性染色的平均光密度差异不显著是不是代表我做的有问题呢？
谢谢！


阳性染色的平均光密度 这个指标 就可以了
差异不明显 ，是你软件 的使用有问题 还是 片子本来结果就没什么 差异？

不是可以按照颜色的容差 来自动选定 区域吗、？

请问照荧光显微图前要怎么处理样品？我的是乳浊液样品。我做其他实验需要用这个方法表征一下，看帖子看到楼主有说到玻片的处理，玻片就是一般的盖玻片吗？我的样品是不是直接滴上去就好了。非常感谢！

楼主，你好
我想问为什么有时免疫组化和荧光原位杂交会有不同的结果？

回复：44楼
用MARK笔 划个圈 ~~

回复：45楼
   你是不是IHC 有结果
但是FISH 没有？
很有可能FISH 的 降解了。。 再就是 操作过程太多 有点失误

版主你好，我现在做免疫组化，正在找一抗，市场上一抗很多，不知道选哪个牌子……
你有听说过bluegene（蓝基）这个牌子吗？质量不知道有保证没？还有它说明书上显示可以做免疫组化但是没有写是适用于蜡块的还是冰冻切片的是不是代表两者皆可呢？万分感谢……