回复：回复60：免疫组化，免疫荧光 咨询帖~~我提供咨询

..........
这个情况 我也没碰到过。。悲剧了。。
做1个IF 能把位点从线粒体 变到 核。。。。。我也不解啊。
等pudson来看看吧

回复：81楼
对啊，就觉得很奇怪
谢谢楼主，关键是想问这个抗体可以用来做细胞的免疫荧光吗？？？抗体说明书上说不适用于ICC和FACS，可以做IHC-P

不能做ICC的 话。。。 你做细胞的IF 也不能做啊。。。。

您好！我做细胞的免疫化学染色出结果了，老师想要荧光的，我却始终做不出来，所有的都是阴性结果，这是为什么？难道我的免疫化学染色时假阳性，蛋白根本没有表达？还是别的什么问题？谢谢！

请问 ，你做免疫化学染色的时候，定位在哪儿？
如果是做膜或者核的话，出现假阳性的几率不是很大。。。
你可以检查下 荧光染色的 实验。
如果免疫化学的定位是细胞浆等，那就重新确认下 你以前的免疫化学染色是不是假阳性。

您好：我想问一下我用的二抗是ALEX 488和568，染完后用甘油封片，在不加防淬灭剂的条件下，能保存多久？（4度暗盒）

回复：86楼
你咨询 他们只 可能说 他们技术部并没有确认能用于IHC的石蜡切片，你自己要试验才知道。
尽量找符合条件的抗体吧，如果真没有，就只有自己先做预试验 看看。

回复：87楼
。。这个没试过。。。
估计不能维持很久吧。。最多6-7小时吧。。

楼主您好，我打算做组织免疫荧光染色，有两个问题烦请楼主解答：
１、我要在组织切片上区分一种细胞的两个亚群，需要三个抗体标记，A用于鉴定是这种细胞，B在这种细胞的Ⅰ型上表达，C在这种细胞的Ⅱ型上表达。请问，这样的情况，需要做三色染色吗？还是用双色染色就可以？
⒉、我在abcom公司找到了这三种抗体：A是小鼠单克隆抗体，B是大鼠单克隆抗体，C是兔多克隆抗体（我的实验动物是小鼠）。请问，如果需要做三色染色这样的一抗组合可以吗？要检测的组织标本是小鼠的，有两个单抗都是鼠的（一个小鼠，一个大鼠）会不会很容易产生交叉反应？

楼主您说的“做冷冻切片的话新鲜组织要 先用OCT或 Cryomatrix 进行包埋，速冻。
然后-80 保存。 ”能给一个详细的procotol吗？因为我养动物的地方离-80°冰箱很远，不能取了标本后马上放到冰箱里面，只能用冰盒转运，不知道这样行不行？

回复：91楼
1.你可以三染，或者用同1批切片分开做双染，也行。
2.你的A抗体 小鼠抗小鼠 ？ 这个你2抗 要注意不能跟你的实验小鼠标本发生交叉反应。。
其他的没什么问题。

回复：92楼
你可以考虑 拿个小液氮罐 装你取的新鲜实验标本，然后转至-80也行。

你多抗 怎么选IgG?
你对应哪个IgG...这样做出来的对照 不具备说服力啊
.
多抗的对照 还是选择 与一抗来源相同的 正常血清好了