免疫组化，免疫荧光 咨询帖~~我提供咨询

忘记说了 ，肯定有很多老师比我牛X很多吧 ·~
呵呵 献丑了
不过还是希望能对大家有所帮助。

您好！
请问，免疫组化与免疫荧光有什么区别？
在做实验时，如何选择这两种方法。
谢谢！

其实IHC和IFC本质都是一样的。只是最后的显色方法不一样，IHC是用酶加底物进行显色反应，用普通光镜观察；IFC是直接用带有荧光物质连接的二抗与一抗结合，在相应波长的激发光下观察。
我也倾向于IHC，理由如下：
IHC的级联放大作用使得抗原比较少的组织也能有很强的着色。我一般用ector公司的Elite系列ABC kit，HRP－DAB显色系统。
IHC的切片可以长期保存。很多时候试验做出来了，需要反复的看片子。而IFC的有荧光猝灭，无法长久保存。所以不利于反复阅片。
IFC有利于做Multiple Labeling，比如在同一location的两种或多种抗原的比较，通常用IFC；IFC还多用于活细胞的staining，但如果是石蜡切片，总会有一些自发荧光现象存在。所以个人认为，能用IHC的时候建议不用IFC。


。。昨天下午出去医院办事去了。。。然后就没回来公司了。
不好意思。
IHC和IF 区别 楼上说的很好。
1.做实验时，主要看蛋白的表达量（组织标本和哪种蛋白），如果IHC 你要检测的蛋白 在你试验组织上表达不好（这个可以查到的，http://www.expasy.org/），这个时候可以用IF，因为显微镜放大IF的片子和放大IHC的片子，观看的效果有很大区别，IHC放大了比较多， 就什么也看不见了, 但是荧光显微镜里面看颜色就好看多了。
2.一般能用IHC的 还是推荐不要用IF ，一是IF 要求比较高（比如说冷冻切片等），一般价格比较贵；二是 IF的结果不能保存。综合实验经费和论文结果，除非特别规定要IF 的，一般最好用IHC
（注：我说的主要针对做论文SCI研究的，因为一般的蛋白表达都很成熟了，所以有第1条。）

如果冰冻切片机和荧光显微镜都有的话，免疫荧光也不麻烦，荧光二抗也不贵。
综合上面的观点，如果蛋白表达量较低，或组化染色不理想，或想做双标的话可以选用IF

总感觉做IF 比做IHC 要花的钱多 。。。
哈哈
楼上的不错 。学习了哈 。

忘记说了 。
免疫荧光相关资料 我百度空间里面有。。
还有 实验设计的方法
大家有需要的可以点我ID 进我空间 看看 。

你好！请问用于做免疫组化（石蜡和冰冻切片都适用）的一抗能否用于做免疫荧光？说明书上没有明确说明，但说了可以做IHC-P、IHC-Fr、flow cytometry，但就是没写能否用于immunofluorescence！

先问问厂家， 一般来说都是可以做的。
最主要是，厂家 技术部他们也许做过IF ，但是也许是结果不够好，所以没写上来。
所以你自己摸条件就比较麻烦一点。。

你好 我这段时间一直在查某蛋白的一抗，想做组织的免疫组化。但我在abcam公司主页查到此一抗的Applications是IP,WB,
我很困惑，到底要不要定这个抗体呢？IF/ICC是不是做细胞的免疫荧光？ 能不能通用做组织的免疫组化呢？
希望高手 老师 赶紧回答！！！谢谢！！！
本人的是国家课题，不差钱！

你好 我这段时间一直在查某蛋白的一抗，想做组织的免疫组化。但我在abcam公司主页查到此一抗的Applications是IP,WB,IF/ICC
我很困惑，到底要不要定这个抗体呢？IF/ICC是不是指细胞的免疫荧光？ 此抗体能不能通用做组织的免疫组化呢？
希望高手 老师 赶紧回答！！！谢谢！！！
本人的是国家课题，不差钱

我要做胃癌组织的免疫组化，测两个指标：促血管生成素-2（angiopoietin-2）和MVD的瘤内表达，现在买试剂，可是不知道哪家公司的试剂好，武汉博士德的试剂如何？这种抗体，国产的和国外进口的哪种好些？能不能介绍几个好点的试剂公司？

你好，国内 免疫病理方面的 抗体 ，国产的迈新、中杉金桥、北京博奥森 ，我都用过~~
建议 1抗 买进口的 比如SIGMA ,CST ，要国产的话就买迈新 还不错。
然后 2抗 就国内 上面几个都行。

谢谢指教哈！看了这几家公司的，考虑用北京博奥森的了，再次谢谢啦！