一、豚鼠的采血方法 1、耳缘切口采血法： 先对豚鼠耳朵进行消毒，用刀片沿血管方向切开耳缘，切口长约0.5厘米，在切口边缘涂抹20%柠檬酸钠溶液以防血凝，血液即可自切口流出。此法每次可采血0.5毫升。 2、足背中静脉采血法： 固定豚鼠，将其一后肢膝关节伸直，消毒脚背，找出足静脉，左手拇指和食指拉住豚鼠趾端，右手持注射针刺入静脉，拔针后血液立即流出。 3、心脏采血法： 用手指触摸，选择心跳最明显的部位，将注射针刺入心脏，血液

一、泛素化概念 泛素化是指一种由76个氨基酸组成的小分子蛋白质，分子量约为8.5 kDa。泛素广泛存在于所有真核细胞中，其氨基酸序列高度保守，从酵母到人类仅有三个氨基酸的差异。在泛素化过程中，泛素在一系列酶的催化作用下共价结合于靶蛋白。此过程涉及三种泛素化酶的协同作用： ·E1 泛素激活酶：在人类基因组中编码有两种类型。 ·E2 泛素结合酶：人类基因组编码大约40种。 ·E3 泛素连接酶：人类基因组编码超过600种。 1.根据泛素向靶蛋白

免疫荧光（Immunofluorescence，IF）技术是一种强大的生物学工具，它利用荧光标记的抗体来精确定位和定性分析组织或细胞内的特定抗原。在细胞生物学研究中，细胞免疫荧光染色尤为常见，它能够帮助科学家们深入了解细胞内部的结构和功能。接下来，我们将详细介绍细胞爬片免疫荧光实验的操作步骤及一些小技巧。 实验器材及试剂 • 仪器和耗材：洁净工作台、CO2恒温培养箱、涡旋混合器、移液枪、正置荧光显微镜、成像系统。 • 试剂：4%多聚甲醛

在进行病理分析时，切片染色无疑是至关重要的一环。尽管大家都曾尝试过，但成果却千差万别。为何别人做出来的切片染色那么好看，而自己总是做不好？ 今天小编给大家分享一些切片染色的独门绝技。 石蜡切片技巧 1. 样本取材 • 迅速行动，避免组织细胞成分与结构的改变。 • 轻柔操作，最大限度减少样本损伤。 2. 样本固定 • 固定液需即配即用，以防氧化还原反应导致失效。配置后置于阴凉避光处保存。 • 确保固定液充足（通常为样本体积

生物透射电镜在生物学探究中扮演着核心角色，它能提供高清晰度的图像，用以观测细胞的微观构造、病毒微粒以及生物大分子的架构，并且能够通过冷冻手段达成对生物体系中动态过程的观测，对于众多生物学研究范畴而言具有不可或缺的意义。 在谈及常规生物电镜样本制备流程时，我们可将其概括为六个环节：样本采集→样本处理→去水→包埋→超薄切片→电子染色。接下来，我们将对各环节的关键点进行简要阐述。 1、样本采集 样本采集的关

杂菌污染是实验过程中屡见不鲜的难题。在进行平板划线接种时，一旦察觉细菌受到杂菌的侵扰，我建议尽快重新培育新的细菌样本，以免后续实验衍生出更多误差。 关于如何有效防止杂菌污染的再次发生，以下是我提出的几点提议： 1、 定时更新培养基，并验证抗生素的有效性： 长时间使用的培养基可能会导致细菌生长状况欠佳或遭受杂菌污染。因此，我们需要定时更换新的培养基来降低这种风险。同时，验证抗生素是否仍然有效也至关重要，抗

细胞培育是一项细致且高度技术性的任务，涵盖了细胞的增殖、繁衍、传代及冷冻保存等多个步骤。每一步骤均需谨慎操作，以保障细胞的健康状态和实验的精确度。今日，小曼将为大家阐述细胞从复苏至传代再到冷冻保存的流程里，一些或许被忽视却至关重要的细节。 1、如何挑选细胞培养基？ 若所购细胞来源于ATCC或其他细胞库，可直接咨询供应商或查阅相关文献资料；培养基的种类繁多，其中最为常用的有四种——MEM、DMEM、1640、F-12。具体可参

如何挑选WB封闭液？ 在目标蛋白检测之前，WB封闭的步骤旨在封锁膜上未结合的区域，以避免抗体的非目标性结合。 封闭剂内含非目标性蛋白或其他分子，它们能与膜表面的非特异性位点结合，从而减少抗体与膜的非目标性结合，并减弱背景噪声。此外，封闭还能增强膜的稳定性，防止在抗体孵育过程中膜变干或受损。 封闭液中的蛋白质能够结合到膜上的空白区域，通过物理性填补（堆积）和吸附覆盖的方式牢固地附着在膜上。这种“填补”和“遮

如何挑选WB封闭液？ 在目标蛋白检测之前，WB封闭的步骤旨在封锁膜上未结合的区域，以避免抗体的非目标性结合。 封闭剂内含非目标性蛋白或其他分子，它们能与膜表面的非特异性位点结合，从而减少抗体与膜的非目标性结合，并减弱背景噪声。此外，封闭还能增强膜的稳定性，防止在抗体孵育过程中膜变干或受损。 封闭液中的蛋白质能够结合到膜上的空白区域，通过物理性填补（堆积）和吸附覆盖的方式牢固地附着在膜上。这种“填补”和“遮

正确的样本保存方法是实验成功的关键，因为不当的保存技术可能会导致样本变质或受损。我们深知，在实验开展前，如何妥善保存细胞、组织、植物和细菌等各类样本，是众多研究者面临的一大难题和学习重点。因此，我们将深入讨论并分享不同样本的处理与保存策略，期望能为您提供有益的参考。 一、细胞样本保存 01悬浮细胞 • 首先，将细胞及其培养液一并收集至15ml或50ml的离心管中，以1500rpm的速度离心3分钟，随后弃去上清液。 • 接着，加入

在进行Western Blot（WB）实验时，SDS-PAGE凝胶的制备是至关重要的一步，它直接影响到后续实验结果的清晰度和准确性。以下是一些关于SDS-PAGE凝胶制备的技巧及常见问题的解决方法： SDS-PAGE凝胶制备步骤 1. 玻璃板梳子的清洁 • 步骤：先用自来水浸泡玻璃板5分钟，然后用洗洁精清洗。注意厚玻璃板两侧沟槽容易残留胶，可以用尖锐的东西轻刮。之后用自来水冲洗干净泡沫，再用纯水冲洗。最后，可以选择37度烘干或者使用吹风筒吹干，但注意避免用热风

实时荧光定量逆转录PCR（real-time quantitative reverse transcription PCR，简称RT-qPCR）是一种在PCR实验中，以RNA为起始材料的检测技术。此方法首先利用逆转录酶，将总RNA或信使RNA（mRNA）转录成互补DNA（cDNA）。 接着，以生成的cDNA作为模板，进行实时荧光定量PCR反应。RT-qPCR技术已广泛应用于分子生物学的多个领域，如基因表达水平分析、RNA干扰效果验证、微阵列数据验证、病原体筛查、基因诊断以及疾病相关研究。 RT-qPCR的两种实施方式：一步法与两步法 一步

一、实验前期筹备 在进行细胞传代之前，有几项关键的预备工作需要完成： 1. 预热试剂：首先，将配置完毕的培养液、PBS溶液以及胰蛋白酶瓶置于37°C的水浴锅中进行预热。这一步骤对于确保细胞在最佳温度下生长至关重要。 2. 消毒处理：接下来，使用75%浓度的酒精对经过紫外线消毒的超净工作台以及操作者的双手进行彻底擦拭，以减少实验过程中的微生物污染，确保实验环境的纯净。 3. 器械布置：合理摆放实验所需器械，确保操作空间充足，既便

荧光素酶报告基因（Luc）系统，依托荧光素为底物，巧妙检测萤火虫荧光素酶活性。此酶能催化荧光素氧化为oxyluciferin，过程中释放生物荧光，成为研究热点。 荧光素酶家族庞大，能催化多样底物发光，而哺乳细胞却无此内源酶。其中，细菌荧光素酶因热敏性在哺乳细胞研究中受限；萤火虫荧光素酶则凭借高灵敏度、宽检测范围（7-8个数量级），成为哺乳细胞研究的首选，尤其适合高通量筛选。更值得一提的是，新型萤火虫荧光素酶无需细胞裂解即

#01腹腔注射构建模型 选取6至8周雄性C57BL/6小鼠（体重约18-20g），首先称重并观察其状态，排除呼吸异常、毛发无光泽、行为异常或驼背等不健康个体。CCl4通常以0.5-0.7µL/g体重的比例稀释于玉米油中用于造模，而急性中毒模型则需更高剂量（0.8-2µL/g体重），但需在1-3天内安乐死小鼠。注意，注射液（CCl4或CCl4/玉米油混合液）应保持室温或接近体温。 为便于操作，建议固定注射体积为50µL，根据小鼠体重调整CCl4与玉米油的比例，确保总体积达到50µL。例

随着精神神经相关疾病的发病率逐年上升，构建相关疾病的动物模型已成为精神神经科学研究的重大课题。本文将从不同类别、各类实验的具体操作、实验的利弊等多个维度进行阐述。 实验动物的行为学评估是构建动物模型的前提，它能为研究者提供大量宝贵信息，有助于建立更加贴近真实的精神神经相关疾病动物模型。 一、学习记忆类 学习与记忆能力是人类的核心认知功能之一，其在精神疾病中的异常也颇为常见。在动物行为学评估中，常用的学

流式细胞术（flow cytometry，FCM）是一种可在细胞或分子水平，对单细胞和亚细胞结构进行快速检测、分析或分选的多功能生物技术。由于其具有可对大量细胞进行高通量检测、可对单个细胞进行多参数分析，和能够同时进行细胞分析和细胞分选等优势，FCM在生物医学基础研究和临床研究中得到了广泛应用。 FCM在20世纪50年代被首次提出，并在此后得到快速发展和广泛应用，这得益于生物样品液流技术、细胞分选计数技术以及计算机数据采集与信号分析

ELISA（酶联免疫吸附测定）实验常见标本的采集处理及保存方法对于确保实验结果的准确性和可靠性至关重要。以下是对血清、血浆、细胞培养上清、细胞裂解液、组织匀浆液以及尿液、唾液等其他液体生物样本的采集处理及保存方法的详细介绍。 PART 01样本的收集与处理01血清 • 收集：使用无热原、无内毒素的试管或离心管采集静脉血。 • 处理：将试管或离心管室温放置2小时或4℃过夜，使血清析出。随后，在4℃条件下以1000×g离心20分钟，仔细收

一、淋巴结组织处理要点 1、淋巴结组织特性为结构紧密、细胞繁多，取样时需确保组织片厚度均匀，推荐0.2-0.3cm为最佳； 2、因淋巴结外包一层坚韧的结缔组织膜，阻碍液体渗透，故固定时间需延长至6-12小时，甚至可整夜固定，次日与常规组织同步脱水。若采用中性甲醛固定及乙醇脱水，两者时间均需加倍，同时可适当缩减二甲苯透明步骤的时间； 3、切片时，目标厚度为2-3μm，此厚度下组织易碎，展片时易出现皱褶、裂隙及不平整。因此，蜡块不

采血作为动物实验中常见的操作，对于药物研究以及疾病的诊断、治疗、监测至关重要。实验犬猫的动、静脉采血操作需要细致、准确，以确保采样的质量和动物的安全。本文将详细介绍实验犬猫动、静脉采血的操作步骤及注意事项，以期为实验提供参考。 动脉血液采集 动脉血液采样主要用于评估呼吸功能、严重凝血障碍等。采血时，应避免在细菌污染和感染风险高的部位采血，如局部组织损伤、皮肤感染区域。 操作步骤 1、保定姿势：将动物置于